Structural Studies of
福莫西汀耐药蛋白（FosA）是一类二聚体金属依赖谷胱甘肽转移酶，可将抗生素福莫西汀（fosfomycin, Fos）与谷胱甘肽（GSH）共轭，使其失去抗菌活性。本研究比较了来自铜绿假单胞菌（FosAPA）和肺炎克雷伯菌（FosAKP）两种 FosA 的功能特征。将两种酶编码序列克隆至 T7 表达载体，并在大肠杆菌中表达可溶性活性蛋白...
Portable Alkaline Phosphatase-Hydrogel Platform: From Enzyme Characterization to Phosphate Sensing.
本文报道了一种将碱性磷酸酶（ALP）通过绿色方案包埋于三维聚合物网络中制备透明水凝胶（ALP@AETA）的研究，该材料可室温储存，并有望作为一次性生物传感器平台用于快速检测ALP抑制剂。作者考察了不同ALP固定策略，并与不含酶水凝胶比较研究新材料性质。通过监测固有荧光随温度的变化，表征固定酶的构象与稳定性，以研究水凝胶内酶的展开/折...
Practical and Rapid Membrane-Based Biosensor for Phenol Using Copper/Calcium-Enzyme Hybrid Nanoflowers.
酚是化学工业废水中常见的有毒污染物，即使低浓度也具有强毒性。本研究报道了一种绿色、简便、快速的酚定性生物传感方法，采用辣根过氧化物酶（HRP）与铜离子（Cu2+）或钙离子（Ca2+）通过蛋白-无机自组装制备杂化纳米花（hNF），并将其负载于聚偏氟乙烯（PVDF）膜上。SEM、EDS、FTIR 和 XRD 证实酶被有效包埋于杂化结构中...
Immobilizing Enzymes on Noble Metal Hydrogel Nanozymes with Synergistically Enhanced Peroxidase Activity for Ultrasensitive Immunoassays by Cascade Signal Amplification.
酶固定化可改善酶稳定性与可重复使用性，但常降低其生物活性与催化效率。本文合成具有分层多孔结构的PdCu水凝胶纳米酶，用于固定辣根过氧化物酶（HRP），获得PdCu@HRP。除提高稳定性和可重复性外，PdCu@HRP表现出高于天然HRP和PdCu水凝胶的协同增强过氧化物酶活性。作者提出PdCu水凝胶纳米酶与酶之间的特异性相互作用，以及...
Paper-Based Enzymatic Colorimetric Assay for Rapid Malathion Detection.
纸基生物传感器因成本低、便于现场分析而受到关注。实现快速灵敏检测需要在纸上固定高表观活性酶，但具有挑战。本文报道一种改进方法，通过 Pluronic F127（PF127）-聚丙烯酸（PAA）-酶互锁网络将马拉硫磷降解酶 PoOPHM9 固定于滤纸。加入 PF127 提高了酶活性保留，固定化酶表观 Vmax 较无 PF127 纸提高...
Smartphone-assisted robust enzymes@MOFs-based paper biosensor for point-of-care detection.
便携式、快速且经济的临床诊断设备推动了即时检测（POC）技术发展。本文报道了一种智能手机辅助的仿生金属有机框架（MOFs）纸基比色传感器（SBMCP），用于按需检测内源疾病相关生物分子。该平台模拟细胞内级联信号转导：单酶或多酶被原位包埋于ZIF-8外骨骼中，通过ZIF-8可及微孔网络实现对目标分析物的敏感、选择性识别，并将识别事件经...
Immobilization of Penaeus merguiensis alkaline phosphatase on gold nanorods for heavy metal detection.
本文报道了一种基于固定在金纳米棒（GNRs）上的对虾碱性磷酸酶（PM ALP）用于重金属检测的生物传感器方法。PM ALP 通过离子交换和疏水相互作用固定化在 GNRs 表面。固定化 PM ALP 水解对硝基苯磷酸酯（p-NPP）的最适 pH 和温度分别为 11.0 和 60 °C。动力学研究符合 Michaelis–Menten ...
Biochemical characterization and immobilization of Erwinia carotovoral-asparaginase in a microplate for high-throughput biosensing of l-asparagine.
L-天冬酰胺酶（L-ASNase，E.C. 3.5.1.1）催化 L-天冬酰胺转化为 L-天冬氨酸和氨。本研究从 Erwinia carotovora 中克隆、表达并表征了一种新的 L-ASNase（EcaL-ASNase），在 Escherichia coli 中以可溶蛋白形式表达，并通过离子交换色谱单步纯化至均一。作者采用动力学...
An in-line photonic biosensor for monitoring of glucose concentrations.
本文报道两种基于 PDMS 的光子生物传感器设计，用于连续监测葡萄糖浓度。第一种为内部固定化传感器，由反应腔、微透镜和光纤自对准结构组成，在 33 µL/h 连续流动下，通过葡萄糖氧化酶（GOX）与辣根过氧化物酶（HRP）共固定于反应腔内部 PDMS 表面实现光学检测。比较了简单吸附和 PEG 共价结合两种共固定方法，PEG 方法有...
Co-immobilized glucose oxidase and β-galactosidase on bovine serum albumin coated allyl glycidyl ether (AGE)-ethylene glycol dimethacrylate (EGDM) copolymer as a biosensor for lactose determination in milk.
本研究将牛血清白蛋白（BSA）在pH 8.0下吸附于25%交联密度的烯丙基缩水甘油醚–乙二醇二甲基丙烯酸酯共聚物微球（AGE-25）表面，形成含氨基、巯基和羧基的蛋白涂层。利用戊二醛、二琥珀酰亚胺基碳酸酯（DSC）和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺（EDC）分别活化BSA的NH2、SH和COOH基团，将黑曲霉葡萄糖氧化酶...