Improved Functional Expression of Cytochrome P450s in
细胞色素P450酶(P450s)是广泛存在的血红素-硫醇蛋白超家族,在代谢网络和次级代谢中起关键作用,但其在酿酒酵母中表达水平低、活性不足是研究与应用的主要瓶颈。为提高P450s在酿酒酵母中的功能表达,本研究将拟南芥cDNA文库在产生甜菜碱的酵母菌株yJS1256中过表达,并利用该菌株作为生物传感器进行高通量筛选。筛选鉴定出AtGR...
细胞色素P450酶(P450s)是广泛存在的血红素-硫醇蛋白超家族,在代谢网络和次级代谢中起关键作用,但其在酿酒酵母中表达水平低、活性不足是研究与应用的主要瓶颈。为提高P450s在酿酒酵母中的功能表达,本研究将拟南芥cDNA文库在产生甜菜碱的酵母菌株yJS1256中过表达,并利用该菌株作为生物传感器进行高通量筛选。筛选鉴定出AtGR...
辛酸是一种具有工业价值的化合物,可用于抗菌剂或作为生物燃料前体。通过酵母进行微生物生物合成是替代当前不可持续生产方法的有前景途径。为在酿酒酵母中提高辛酸滴度,本研究使用此前开发的基于辛酸响应 pPDR12 启动子偶联 GFP 的生物传感器,并建立适合对辛酸生产菌株文库进行高通量筛选的生物传感器菌株。通过开发、优化和执行高通量筛选方法...
乙酸积累表明过程因微生物组成紊乱而失衡。因此,监测乙酸浓度是控制沼气过程的重要参数。本文报道并验证了一种基于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的荧光全细胞生物传感器,用于检测乙酸。乙酸可诱导一组基因转录。作者将这些基因的5′调控序列(5′ URS)克隆至多拷贝质粒,以驱动红色荧光报告基因表达。编码细胞壁相关...
合成生物学使重组微生物能够生产用于医药、食品和材料的小分子。产物分泌可降低分离纯化成本,但由于对转运蛋白功能理解有限,工程化改造具有挑战性。本文描述了一种全基因组转运体敲除方法,结合代谢物生物传感器,可在酿酒酵母中鉴定影响特定目标代谢物生产的转运体。作者将该方法应用于外源化合物顺,顺-粘康酸(CCM)、原儿茶酸(PCA)和甜菜红素的...