Biosensor-guided rapid screening for improved recombinant protein secretion in Pichia pastoris.

Microbial cell factories 2023 Navone L, Moffitt K, Behrendorff J, Sadowski P 等 6 人

毕赤酵母（Komagataella phaffii）因高分泌能力广泛用于异源蛋白生产，但高产工程菌株筛选仍是限制步骤。尽管已有分子工具箱用于构建设计和基因整合，转化子克隆变异高，常发生多拷贝和随机整合，因此需对数百个转化子进行功能筛选。常规筛选多基于深孔板培养，并对诱导后样品进行免疫印迹或酶活测定，且每种蛋白常需定制检测。本文开发通...

全细胞生物传感器 毕赤酵母重组蛋白分泌split-GFP克隆筛选

Avoiding entry into intracellular protein degradation pathways by signal mutations increases protein secretion in Pichia pastoris.

Microbial biotechnology 2022 Ito Y, Ishigami M, Hashiba N, Nakamura Y 等 8 人

本研究针对毕赤酵母（Pichia pastoris）中广泛使用的酿酒酵母 α-交配因子前前导肽（MFα）分泌信号，系统评估了包括 V50A 在内的 20 个单氨基酸替换对重组蛋白分泌的影响。结果显示，V50A、V38A、G40D、L42S、L63S、L64S、F65S 和 I66T 等单突变可显著提高抗溶菌酶单链抗体（scFv）的分...

综述或非传感器论文 毕赤酵母分泌信号肽MFα重组蛋白分泌