International journal of molecular sciences
2020
Salgado-Almario J, Vicente M, Vincent P, Domingo B 等 5 人
斑马鱼胚胎是研究心脏功能的低成本脊椎动物模型。许多荧光基因编码钙指示剂(GECI)已被开发,但比率型读出更适合成像心脏等运动器官。作者将四种基于肌钙蛋白C的比率型GECI——TN-XXL、Twitch-1、Twitch-2B和Twitch-4——瞬时表达于斑马鱼胚胎心脏,其发射比率可报告心房和心室的Ca2+水平。作者测量了Ca2+瞬...
Frontiers in chemistry
2020
Ghosh S, Chen Y, George A, Dutta M 等 5 人
本研究合成了一种用于检测钙离子的简单光学适配体传感器。该传感器采用半导体量子点(QD)与金纳米颗粒(AuNP)作为供体-猝灭体对,基于荧光共振能量转移(FRET)原理工作。钙离子结合后,DNA适配体发生构象变化,改变分别连接在适配体5′端和3′端的QD与AuNP之间的距离,从而导致QD发射被猝灭。在35 nM钙离子浓度下,传感器实现...
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2020
Liu H, Yi P, Zhao W, Wu Y 等 8 人
许多膜受体受营养物质调控,但单一受体如何整合多种营养信号仍不清楚。钙敏感受体(CaSR)可被钙离子和多种氨基酸等调节,是维持细胞外钙稳态的关键 G 蛋白偶联受体。本研究开发了一种无细胞时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)构象型 CaSR 生物传感器,通过精确控制环境营养物浓度,解析受体激活伴随的主要构象变化。该体系显示,Ca2...
Bio-protocol
2020
Milliken BT, Doyle RP, Holz GG, Chepurny OG
G蛋白偶联受体(GPCR)受激素或神经递质刺激后,常引起胞浆环磷酸腺苷(cAMP)和钙离子(Ca2+)浓度改变,从而触发细胞反应。本文描述一种基于微孔板读板机的荧光共振能量转移(FRET)检测方法,利用基因编码生物传感器 H188 和 YC3.60,在单层或悬浮活细胞中实时监测 GPCR 激动剂处理后 cAMP 或 Ca2+ 浓度变...