铜绿假单胞菌在亚致死抗菌暴露下会诱导脂多糖（LPS）表面修饰，掩盖抗生素结合位点并促进外膜（OM）修复与耐药。本研究利用这些外膜损伤响应操纵子构建全细胞生物传感器，以发现特异性靶向 OM 的新抗菌剂。基于 pmr（多粘菌素耐药/氨基阿拉伯糖 LPS 修饰）和 speD2E2（亚精胺合成）操纵子的染色体 luxCDABE 转录报告基因...
用竞争性免疫分析检测痰液绿脓菌素（PYO）是诊断铜绿假单胞菌呼吸道感染的一种有前景的方法。然而，竞争性免疫分析无法设置阴性对照来评估基质效应，且痰液基质复杂，常干扰目标物检测。本文表明，采用纸基生物传感器进行竞争性免疫分析可缓解这些问题。该平台由含抗体修饰金纳米颗粒的纸基储液器和含竞争识别元件的纸基底物组成，后者修饰有白蛋白-抗原偶...
许多革兰氏阴性菌利用N-酰基-L-高丝氨酸内酯（AHL）进行群体感应，调控生物膜和毒力因子产生。群体淬灭酰基酶可降解AHL，但需要高活性、高特异性且可材料固定的候选酶。本研究对Pseudomonas aeruginosa PvdQ和Acidovorax sp. MacQ开展PROSS辅助蛋白工程，获得P1-P3和M1-M3变体，并建...
微生物生物膜污染是普遍问题，需要精确快速检测技术以有效控制其生长。微加工电化学阻抗谱（EIS）生物传感器有望用于早期生物膜检测和清除监测。本研究利用集成传感器的定制流路系统，在流动条件下对生物膜生长进行实时阻抗测量，并与共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）成像相关联。在基础水相培养基（胰酪大豆胨肉汤，TSB）和油-水乳液（金属加工液，M...
细菌毒力基因表达受群体感应（QS）调控，抑制QS是抗毒力策略。N-乙酰半胱氨酸（NAC）具抗菌活性，但能否干扰细菌QS通讯尚不清楚。本研究通过分子对接和体外实验评价NAC作为铜绿假单胞菌PAO1 QS抑制剂（QSI）的潜力，并考察其与妥布霉素联合作用。分子对接显示NAC与LasR、RhlR的结合方式类似AHL，提示其可能结合QS受体...
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一类可引起即食食品腐败的典型革兰阴性菌。本研究利用发光报告基因 luxCDABE 构建了基于铜绿假单胞菌 PAO1 的细胞基生物传感器 PAO1-CE，旨在快速筛选能够抑制该菌生长的抗菌物质。实验选取五种类别共六种抗生素作为模型测试物，包括硫酸链霉素、羧苄西林、氨苄西林、...
由于微生物感染和食源性疾病频发，亟需快速、灵敏的病原菌现场筛查方法。本研究开发了一种高灵敏多重侧流层析试纸条（LFA），利用小麦胚芽凝集素（WGA）修饰的磁性量子点（Mag@QDs）作为通用检测纳米探针，在复杂样品中同时检测铜绿假单胞菌和鼠伤寒沙门氏菌。Mag@QDs-WGA标签具有200 nm Fe3O4核心和多层量子点壳，可广谱...
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa, P. aeruginosa）是医院感染中最常见的病原菌之一。本文构建了一种基于双链DNA分支迁移诱导杂交链反应（HCR）和DNAzyme反馈回路的新型荧光生物传感器，用于敏感检测P. aeruginosa。P. aeruginosa与DNA三叉连接结构上的适配体特异性结合...
铜绿假单胞菌具有固有抗生素耐药机制，碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌被列入2017年世界卫生组织抗生素耐药关键危害优先名单。早期检测有助于规避治疗难题。目前已发展多种检测技术，生物传感器因操作简便、快速、低成本、高灵敏度和选择性，在即时诊断领域受到关注。生物传感器可将生物识别元件（抗体、适配体）与病原体之间的特异性相互作用转换为光学、电学及...
本研究测定桉树（Eucalyptus globulus）叶片甲醇提取物对临床分离多药耐药铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的抗群体感应（AQS）和抗生物膜活性。首先采用琼脂孔扩散法，以紫罗兰色细菌（Chromobacterium violaceum ATCC 12472）为报告菌株，通过紫罗兰色素抑制圈初步...
源自海洋海绵的天然产物表现出生物活性，某些情况下可作为强效群体感应抑制因子，阻止病原微生物生物膜形成并降低毒力因子表达。本研究评价了从海洋海绵 Aplysinella rhax 中分离的 psammaplin 型化合物 psammaplin A (1) 和 bisaprasin (2) 在基于铜绿假单胞菌 PAO1 lasB-gfp...
铜绿假单胞菌产生的铁载体绿脓菌素（pyochelin, PCH）是重要毒力因子，可在感染过程中促进细菌生长。尽管体内 PCH 产生证据充分，但生物样品中 PCH 定量困难，传统方法需大体积提取、有机溶剂处理和耗时纯化。本文报道一种生物发光全细胞生物传感器，用于快速、灵敏、单步定量生物样品中的 PCH。作者将 PCH 合成基因 pch...
本研究以铜绿假单胞菌粗细胞外混合物（CEM）为靶标，利用随机DNA文库经8轮体外筛选获得具有高效切割活性和强特异性的DNAzyme PAE-1。基于该DNAzyme设计荧光生物传感器：PAE-1与5′-FAM标记、3′-淬灭基团标记的DNA底物退火形成分子信标样复合物，荧光被淬灭；当CEM中存在10–50 kDa靶蛋白时，DNAzy...
本研究对前期从印度泰米尔纳德邦丁迪古尔地区水样中分离的三株耐氟假单胞菌 THP6、THP41 和 OHP5 进行进一步鉴定与功能分析。在 LB 肉汤和 LB 琼脂平板上确认其具有较高氟耐受能力。血琼脂平板显示三株菌均产生 β-溶血。PCR 检测发现 gyrB、toxA、algD、lasB、plcH 和 rhlC 等毒力基因以及 ps...
临床需要简单、定量的工具检测黑尿病患者体内的尿黑酸。本研究报道了一种基于绿色荧光蛋白表达的全细胞生物传感器，用于检测尿黑酸并辅助诊断黑尿病。该传感系统利用从铜绿假单胞菌基因组中分离的 hmgA 启动子序列，构建 phmgA::GFP 转录融合模块。为提高灵敏度，作者将该传感模块转入多个在苯丙氨酸和酪氨酸经尿黑酸代谢步骤中受损的转座子...
在多重耐药菌广泛流行的背景下，关键医疗表面的细菌定植需要尽快检测。本文提出一种非破坏性表面增强拉曼散射（SERS）方法用于检测细菌定植。SERS 能够以高灵敏度监测低浓度目标物质。作者通过柠檬酸稳定金纳米颗粒（AuNPs）的聚集制备 SERS 基底，并在基底上预吸附结晶紫（CV）、硫胺素（B1）和腺嘌呤（A）作为 SERS 报告物。...
本研究旨在考察艾叶提取物（AALE）对铜绿假单胞菌 PAO1 的群体感应（QS）抑制活性及其分子机制。以 C. violaceum CV026 为生物传感器，AALE 可显著抑制紫罗兰素产生而对菌体生长影响较小；较高浓度则抑制生长。亚抑菌浓度 AALE 以剂量依赖方式降低 PAO1 的 QS 调控毒力因子（绿脓菌素、弹性蛋白酶、鼠李...
水被病原菌污染是全球重大公共卫生问题，但快速监测水体细菌污染仍具挑战。本研究利用合成生物学构建了一种新型全细胞生物传感器，用于检测铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）和类鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei）引起的水体污染。该传感器通过响应目标病原菌分泌的群体感应信号分子实现检...
遗传编码逻辑门，尤其是反相器（NOT门），是合成生物学中设计遗传电路、工程化生物传感器和决策装置的基本构件，但适用于不同物种的反相器资源仍然有限。本研究将此前在特定大肠杆菌菌株中验证的一批 NOT 门重新构建为广宿主范围（BHR）质粒载体集合，并将其组装到 SEVA（Standard European Vector Architec...
医院感染、食品与环境安全对关键病原菌早期快速、准确、特异和超灵敏检测提出迫切需求。铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是常见机会性革兰阴性菌，广泛存在于水、土壤、空气、动物和人体，可致角膜炎、肺炎、尿路感染、囊性纤维化、脓毒症等，并易形成生物膜，对传统培养、免疫检测、PCR 和 MALDI-TOF-MS 等方...