CRISPR 基技术已被用于病原体的快速高灵敏检测。为检验 CRISPR 基检测策略在铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）感染诊断中的可行性，本研究建立了重组酶聚合酶扩增（RPA）后接 Cas12a 介导检测的联合方法，可通过荧光读取仪或侧流生物传感器读出，命名为 Cas12a-RCFL。Cas12a-RCF...
铜绿假单胞菌在亚致死抗菌暴露下会诱导脂多糖（LPS）表面修饰，掩盖抗生素结合位点并促进外膜（OM）修复与耐药。本研究利用这些外膜损伤响应操纵子构建全细胞生物传感器，以发现特异性靶向 OM 的新抗菌剂。基于 pmr（多粘菌素耐药/氨基阿拉伯糖 LPS 修饰）和 speD2E2（亚精胺合成）操纵子的染色体 luxCDABE 转录报告基因...
用竞争性免疫分析检测痰液绿脓菌素（PYO）是诊断铜绿假单胞菌呼吸道感染的一种有前景的方法。然而，竞争性免疫分析无法设置阴性对照来评估基质效应，且痰液基质复杂，常干扰目标物检测。本文表明，采用纸基生物传感器进行竞争性免疫分析可缓解这些问题。该平台由含抗体修饰金纳米颗粒的纸基储液器和含竞争识别元件的纸基底物组成，后者修饰有白蛋白-抗原偶...
许多革兰氏阴性菌利用N-酰基-L-高丝氨酸内酯（AHL）进行群体感应，调控生物膜和毒力因子产生。群体淬灭酰基酶可降解AHL，但需要高活性、高特异性且可材料固定的候选酶。本研究对Pseudomonas aeruginosa PvdQ和Acidovorax sp. MacQ开展PROSS辅助蛋白工程，获得P1-P3和M1-M3变体，并建...
微生物生物膜污染是普遍问题，需要精确快速检测技术以有效控制其生长。微加工电化学阻抗谱（EIS）生物传感器有望用于早期生物膜检测和清除监测。本研究利用集成传感器的定制流路系统，在流动条件下对生物膜生长进行实时阻抗测量，并与共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）成像相关联。在基础水相培养基（胰酪大豆胨肉汤，TSB）和油-水乳液（金属加工液，M...
细菌毒力基因表达受群体感应（QS）调控，抑制QS是抗毒力策略。N-乙酰半胱氨酸（NAC）具抗菌活性，但能否干扰细菌QS通讯尚不清楚。本研究通过分子对接和体外实验评价NAC作为铜绿假单胞菌PAO1 QS抑制剂（QSI）的潜力，并考察其与妥布霉素联合作用。分子对接显示NAC与LasR、RhlR的结合方式类似AHL，提示其可能结合QS受体...
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一类可引起即食食品腐败的典型革兰阴性菌。本研究利用发光报告基因 luxCDABE 构建了基于铜绿假单胞菌 PAO1 的细胞基生物传感器 PAO1-CE，旨在快速筛选能够抑制该菌生长的抗菌物质。实验选取五种类别共六种抗生素作为模型测试物，包括硫酸链霉素、羧苄西林、氨苄西林、...