Microbial biotechnology
2021
定向进化是优化蛋白质和代谢反应的有效方法，但通常需要在突变、筛选和扩增之间反复迭代，劳动密集且受初始序列空间与筛选通量限制。本文建立了一种整合连续超突变与高通量筛选的定向进化工作流，用于代谢途径酶优化。该工作流利用正交复制系统OrthoRep在酿酒酵母中持续生成目标酶变体，并采用基于转录因子的生物传感器对最佳性能变体进行高通量分选。...
Genes
2019
Tumen-Velasquez MP, Laniohan NS, Momany C, Neidle EL
一个转录调控因子同时对不同效应物作出响应仍较少被研究，但这类相互作用可通过快速整合细胞信号并扩展转录响应范围而显著影响基因表达。本研究利用同源蛋白相似性，对控制 Acinetobacter baylyi ADP1 中苯甲酸盐降解的 LysR 型调控因子 CatM 进行工程化改造。其同源蛋白 BenM 可在 cis,cis-粘康酸和苯...
ACS synthetic biology
2019
Jha RK, Narayanan N, Pandey N, Bingen JM 等 10 人
产物抑制是工业酶应用中的常见瓶颈，传统方法需对大量突变体在多种底物和产物浓度下进行体外测试，且结果可能与全细胞代谢环境不一致。本研究针对工业相关酶莽草酸丙酮酸裂解酶（UbiC）建立了一种高通量体内筛选方法，以缓解其产物抑制。作者首先在工业宿主假单胞菌 Pseudomonas putida KT2440 中工程化了一个高特异性、遗传编...