Evolving Small-Molecule Biosensors with Improved Performance and Reprogrammed Ligand Preference Using OrthoRep.

ACS synthetic biology 2021 Javanpour AA, Liu CC

遗传编码生物传感器可将小分子配体的产生转化为适合高通量筛选或体内选择的读出信号，对优化小分子生物合成途径具有重要意义，但获得具有合适响应函数和配体偏好的传感器仍具挑战。本研究证明，连续高突变系统 OrthoRep 可有效用于进化高性能生物传感器。作者将别构转录因子 BenM 编码于 OrthoRep 上，使宿主酿酒酵母在传代过程中快...

全细胞生物传感器 定向进化OrthoRep粘康酸己二酸

Integrating continuous hypermutation with high-throughput screening for optimization of cis,cis-muconic acid production in yeast.

Microbial biotechnology 2021

定向进化是优化蛋白质和代谢反应的有效方法，但通常需要在突变、筛选和扩增之间反复迭代，劳动密集且受初始序列空间与筛选通量限制。本文建立了一种整合连续超突变与高通量筛选的定向进化工作流，用于代谢途径酶优化。该工作流利用正交复制系统OrthoRep在酿酒酵母中持续生成目标酶变体，并采用基于转录因子的生物传感器对最佳性能变体进行高通量分选。...

全细胞生物传感器 转录因子生物传感器顺,顺-粘康酸定向进化OrthoRep