Cell chemical biology
2016
Bose D, Su Y, Marcus A, Raulet DH 等 5 人
在哺乳动物细胞中,第二信使2',3'-环鸟苷酸-腺苷酸(2',3'-cGAMP)由胞质DNA感受器cGAS产生,随后结合STING并触发干扰素反应,因此cGAS-cGAMP-STING通路在病原识别、癌症和自身免疫疾病中具有重要作用。然而,该通路缺乏适合高通量分析的直接检测工具。作者基于GEMM-II核糖开关支架,通过结构指导的理性...
Mitochondrion
2016
Datta S, Sahdeo S, Gray JA, Morriseau C 等 6 人
线粒体毒性正成为严重健康后果的重要机制。本研究利用已报道的氧生物传感器高通量平台,对176种环境化学物质进行线粒体毒性筛选。在RGC-5大鼠视网膜神经节细胞中,通过384孔氧传感器板监测荧光变化,评估化合物对线粒体氧消耗的影响。结果确认已知线粒体毒素(如鱼藤酮)的作用,并发现新的线粒体解偶联剂,如2,2'-亚甲基双(4-氯酚)和五氯...
Journal of biomolecular screening
2016
Tewson PH, Martinka S, Shaner NC, Hughes TE 等 5 人
基于蛋白的荧光生物传感器可用于研究健康与疾病中的细胞信号转导,但在自动化实验室中的应用受到限制。作者开发了两种可在标准荧光酶标仪上稳定运行的活细胞检测体系,分别用于检测二酰甘油(DAG)和环磷酸腺苷(cAMP)。DAG 传感器采用 mNeonGreen 荧光蛋白与 DAG 结合域融合,经杆状病毒转导进入 HEK293T 细胞,在 G...
Metabolic engineering
2016
Fang M, Wang T, Zhang C, Bai J 等 8 人
由于通路工程方法通常缺乏高通量筛选工具,我们开发了一种名为中间物传感器辅助推拉策略(InterSPPS)的新策略,通过引入靶向关键通路中间物的生物传感器实现通路顺序优化。作为概念验证,我们构建了 L-色氨酸(L-Trp)生物传感器,并用于优化脱氧紫罗兰素(deoxyviolacein)生物合成通路;该通路被分为两个模块,L-Trp ...