Protocol for quantifying LC3B FRET biosensor activity in living cells using a broad-to-sensitive data analysis pipeline.

STAR protocols 2024 Gökerküçük EB, Tramier M, Bertolin G

本文提出一种用于全面定量自噬起始的实验方案，基于 LC3B Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器的读出。该传感器在 proLC3B 的 N 端和 C 端分别融合供体荧光蛋白 Aquamarine 和受体荧光蛋白 tdLanYFP；当 ATG4B 无活性时，proLC3B 保持完整，供体与受体距离较近而发生 FRET；A...

荧光生物传感器 LC3B FRET生物传感器ATG4B自噬荧光寿命成像

The LC3B FRET biosensor monitors the modes of action of ATG4B during autophagy in living cells.

Autophagy 2023 Gökerküçük EB, Cheron A, Tramier M, Bertolin G

尽管多种巨自噬机制已被解析，活细胞实时追踪仍困难。ATG4B 蛋白酶对 MAP1LC3B/LC3B 进行 C 端切割（priming），是自噬激活早期事件。由于缺乏活细胞报告子，作者开发了响应 LC3B 被 ATG4B priming 的 Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器。该传感器由 pH 耐受的供体-受体对 Aq...

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