利用不同模态相互交叉验证的多模态分析策略可有效降低假阳性或假阴性，保证检测结果准确性。本文建立了一种比色、光热和荧光三模态 CRISPR/Cas12a 检测平台（CPF-CRISPR）。设计 MNPs-ssDNA-HRP 信号探针作为底物，用于触发三种信号输出。当存在 DNA 靶标时，MNPs-ssDNA-HRP 被激活的 CRIS...
CRISPR/Cas 生物技术为生物传感器开发提供了高效平台。现有 CRISPR/Cas12a 传感系统虽可用于核酸、小分子、小蛋白和微生物检测，但均依赖 DNA 报告子，限制了进一步应用。本研究建立了一种基于 RNA 报告子的 CRISPR/Cas12a 生物传感系统。基础系统中，Cas12a 与 gRNA 形成核糖核蛋白复合物，...
本研究提出一种基于CRISPR/Cas12a检测3′–5′外切酶活性的方法。3′–5′外切酶（Exo III）参与DNA修复、复制校对等细胞过程，其表达失衡与癌症等疾病风险增加相关。作者将Cas12a激活序列构建于发夹探针（HP）的5′端，使探针形成平末端。当HP的3′端被Exo III水解时，原本隐藏的Cas12a激活序列被暴露，...
针对清真食品掺假这一全球性问题，本文提出一种基于CRISPR/Cas12a介导的重组酶聚合酶扩增（RPA）检测方法，将RPA等温扩增与Cas12a切割相结合，用于检测食品中的猪源成分。作者优化了Cas12a切割步骤的试剂浓度，并设计筛选了靶向线粒体细胞色素C氧化酶亚基I（COX1）基因保守区域的向导RNA（gRNA）。该方法在5–1...
CRISPR/Cas系统因侧切活性成为分子生物传感工具，但直接用于原位细胞内检测仍具挑战。本文首次提出CRISPR/Cas辅助纳米针传感器nanoCRISPR，用于活细胞内ATP检测。该传感器采用两步过程：先在细胞质中呈现与纳米针连接的适配体锁定Cas12a激活子，ATP识别事件使固定在纳米针上的激活子解锁；随后将纳米针从细胞取出，...
传染病严重威胁公共卫生与全球生物安全。除空气传播外，病原微生物也可在污水等环境液体样本中检出。传统生化检测方法耗时长、成本效益低，且检测限限制早期诊断。本研究制备了直径125 μm的超细等离子体光纤探针，用于CRISPR/Cas12a介导的严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）检测。暴露于光纤表面的单链DNA被Cas1...
由于猴痘（mpox/monkeypox）病毒疫情持续，无症状和前症状携带者识别困难，亟需高灵敏度诊断工具。传统PCR检测虽有效，但特异性有限、设备昂贵笨重、操作费时且依赖扩增。本研究提出一种基于CRISPR/Cas12a的表面等离子共振光纤尖端（CRISPR-SPR-FT）生物传感器。该传感器直径仅125 μm，结构紧凑、稳定性高、...
CRISPR/Cas12a 因具有反式切割活性，已成为新型 DNA 生物传感器开发的关键技术。尽管其在核酸检测中表现突出，但面向非核酸靶标、尤其是皮摩尔以下浓度的通用 CRISPR/Cas 传感系统仍具挑战。DNA 适配体可通过构象变化高亲和、高特异性地结合蛋白、小分子和细胞等靶标。本文利用适配体的多样结合能力，并将 Cas12a ...
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus, S. aureus）是主要食源性病原菌之一，可引起感染性疾病。本研究开发了一种基于跳跃滚环扩增（SRCA）与 CRISPR/Cas12a 系统联用的新型电化学生物传感器，用于准确检测 S. aureus。巯基修饰报告探针（SH-ssDNA-MB）通过 Au–S 键固定于金...