将核酸扩增转化为实用的即时检测（POC）和生物传感器集成诊断，仍受快速样品制备的显著限制。为此，本研究系统比较了七种商业化 DNA/RNA 提取试剂盒及其温度相关调整。对 SARS-CoV-2 阳性鼻咽拭子、病毒原液以及实验室制备的临床相关革兰阳性与革兰阴性细菌悬液进行核酸提取，并用重组酶聚合酶扩增（RPA）和实时 PCR 评估提取...
高危人乳头瘤病毒（HPV）尤其是HPV16 E7的早期检测对宫颈癌预防至关重要。本文报道了一种新型、便携、免仪器的生物传感平台，将重组酶聚合酶扩增（RPA）与CRISPR/Cas12a介导的检测集成于微流控纸基分析装置（µPAD），用于双链DNA（dsDNA）的比色可视化读出。该µPAD具有七个功能区域，包含冻干RPA和CRISPR...
人型支原体（Mycoplasma hominis，MH）是常见条件致病菌，与多种泌尿生殖道感染及严重不良妊娠结局密切相关。现有 MH 检测方法如微生物培养和 qPCR 耗时长且依赖复杂设备，不适合快速或简易检测场景。本研究通过协同整合重组酶聚合酶扩增（RPA）、CRISPR/Cas12a 介导的靶核酸识别和侧流生物传感器，建立了可视...
病原菌严重制约芸薹属白菜（Brassica rapa）生产，气候变化与种植模式变化加剧病害发生。田间多通道快速诊断方法有助于病害早期发现与控制。本研究建立了一种多通道侧流生物传感器（LFB）与 CRISPR/Cas12a 切割检测相结合的方法，用于同时检测白菜四种病害。主要创新包括：（1）通过优化 crRNA 二级结构提高特异性与灵...
副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是重要食源性病原菌，常见于海水和沿海海产品，可引起严重感染和溶血损伤。生物传感器检测技术不断发展，toehold switch 已成为有前景的方向，尤其用于 RNA 病毒检测。本研究开发了一种用于检测副溶血弧菌的无细胞 toehold switch 传感器。传统 toeho...
针对清真食品掺假这一全球性问题，本文提出一种基于CRISPR/Cas12a介导的重组酶聚合酶扩增（RPA）检测方法，将RPA等温扩增与Cas12a切割相结合，用于检测食品中的猪源成分。作者优化了Cas12a切割步骤的试剂浓度，并设计筛选了靶向线粒体细胞色素C氧化酶亚基I（COX1）基因保守区域的向导RNA（gRNA）。该方法在5–1...
纤维基生物传感器为分析诊断装置提供了新途径，但现有纺织基传感器多依赖比色检测。本文报道一种将微流控结构与基于硫醇自组装单分子层（SAM）的电化学读出相结合的编织生物传感器，用于核酸检测扩增（NAATs）。作者系统表征了两种纤维电极：纯金微丝（bond wire）和现成等离子镀金涤纶多丝线，评估其表面形成 SAM 的能力及在编织织物中...
本文开发了一种无试剂 DNA 传感器，结合金纳米颗粒、修饰引物和等温扩增，用于直接检测等温扩增产物，并以有毒微藻 Karlodinium armiger 作为模型分析物。平均直径 14 ± 0.87 nm 的胶体金纳米颗粒用巯基化 33-mer DNA 探针和 (6-巯基己基)二茂铁混合自组装单分子层修饰。修饰引物在引物结合位点与工...
植物病害的早期检测对防止或限制病原扩散、减少经济损失至关重要。传统实验室检测耗时长、成本高且依赖专业人员，在发展中国家尤难普及。近年来，核酸方法在人类/动物健康、食品安全和水分析等领域已证明适合开发检测工具，并越来越多用于植物病原检测。本综述系统分析近年来用于即时检测（POC）植物病原检测与鉴定的核酸方案，涵盖样品前处理/核酸提取、...
致病性蠕虫感染在全球范围内造成严重健康问题与经济负担，及时准确诊断对病原控制至关重要。本文综述了用于检测蠕虫感染的核酸方法最新进展，包括聚合酶链反应（PCR）、实时定量PCR（qPCR）、环介导等温扩增（LAMP）和重组酶聚合酶扩增（RPA），并比较其在灵敏度、特异性、通量、成本和现场适用性方面的优缺点。文中还讨论了核酸生物标志物（...