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FluoSTEPs: Fluorescent biosensors for monitoring compartmentalized signaling within endogenous microdomains.

Science advances 2021 Tenner B, Zhang JZ, Kwon Y, Pessino V 等 8 人

越来越多的证据表明,许多关键胞内信号事件被区室化于动力学不同的细胞微区室中。遗传编码荧光生物传感器是解析区室化信号的强大工具,但现有方法通常依赖目标蛋白融合与过表达,可能干扰天然信号通路。本文提出一类名为 FluoSTEPs(靶向内源蛋白的荧光传感器)的新型生物传感器,将自互补分裂绿色荧光蛋白、CRISPR 介导的基因敲入和荧光共振...

荧光生物传感器 FRETcAMP内源微区室CRISPR-Cas9

Discrimination of single-point mutations in unamplified genomic DNA via Cas9 immobilized on a graphene field-effect transistor.

Nature biomedical engineering 2021 Balderston S, Taulbee JJ, Celaya E, Fung K 等 21 人

单核苷酸多态性(SNP)检测对疾病诊断、药物代谢和基因治疗至关重要,但现有基因分型方法通常依赖 DNA 扩增、荧光探针和复杂光学设备,难以用于现场快速检测。本文报道一种名为 SNP-Chip 的 CRISPR 驱动石墨烯场效应晶体管(gFET)生物传感器。该传感器以液门 gFET 为换能器,在石墨烯沟道表面通过 1-吡啶丁酸连接固定...

Transportome-wide engineering of Saccharomyces cerevisiae.

Metabolic engineering 2021

合成生物学使重组微生物能够生产用于医药、食品和材料的小分子。产物分泌可降低分离纯化成本,但由于对转运蛋白功能理解有限,工程化改造具有挑战性。本文描述了一种全基因组转运体敲除方法,结合代谢物生物传感器,可在酿酒酵母中鉴定影响特定目标代谢物生产的转运体。作者将该方法应用于外源化合物顺,顺-粘康酸(CCM)、原儿茶酸(PCA)和甜菜红素的...