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Membrane-Permeant, Environment-Sensitive Dyes Generate Biosensors within Living Cells.

Journal of the American Chemical Society 2019 MacNevin CJ, Watanabe T, Weitzman M, Gulyani A 等 10 人

环境敏感荧光染料可用于研究活细胞中蛋白活性的时空动态;当连接至蛋白时,其荧光可反映蛋白构象变化、翻译后修饰或蛋白相互作用。然而,此类染料–蛋白偶联物难以载入细胞,通常需电穿孔、显微注射或膜转导肽,这些方法会扰动细胞生理、限制通量或产生荧光囊泡。本文通过改造已验证的环境敏感生物传感器荧光团,使其能够穿过细胞膜而不染色细胞内区室,并可通...

Probing Cdc42 Polarization Dynamics in Budding Yeast Using a Biosensor.

Methods in enzymology 2017 Okada S, Lee ME, Bi E, Park HO

Cdc42 是一种高度保守的小分子鸟苷三磷酸酶(GTPase),在从酵母到人类的多种细胞类型中调控细胞极性建立。由于 Cdc42 的活性在时间和空间上受到动态调控,需要在活细胞中实时监测其激活状态。本章介绍一种用于监测出芽酵母中活性 Cdc42 的简单而稳健的亲和型荧光生物传感器。该传感器由 Cdc42 效应蛋白 Gic2 的 N ...