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Enhancing Electrochemical Biosensor Selectivity with Engineered d-Amino Acid Oxidase Enzymes for d-Serine and d-Alanine Quantification.

ACS applied bio materials 2021

D-氨基酸氧化酶(DAAO)可结合多种 D-氨基酸且亲和力不同,因此开发具有选择性的 DAAO 酶生物传感器仍是实际应用中的挑战。本文提出一种构建具有不同底物选择性生物传感器的方法。首先,通过理性设计在 DAAO 中引入点突变,提高其对 D-丝氨酸的选择性。随后,对野生型酵母 DAAO(RgDAAO WT)以及人源 DAAO W20...

A Rationally and Computationally Designed Fluorescent Biosensor for d-Serine.

ACS sensors 2021 Vongsouthi V, Whitfield JH, Unichenko P, Mitchell JA 等 13 人

溶质结合蛋白(SBP)在配体结合亲和力、热稳定性与构象变化之间形成平衡,可用于小分子运输、传感与趋化。尽管SBP的配体诱导构象变化使其适合作为生物传感器元件,但对其进行蛋白质工程改造难度较大。本研究通过理性设计与计算设计,将一种D-丙氨酸特异性SBP改造为对信号分子D-丝氨酸具有选择性的荧光传感器D-serFS。该传感器通过结合位点...

Quantitative measurements of free and immobilized RgDAAO Michaelis-Menten constant using an electrochemical assay reveal the impact of covalent cross-linking on substrate specificity.

Analytical and bioanalytical chemistry 2021 Moussa S, Chhin D, Pollegioni L, Mauzeroll J

酶基电化学生物传感器在实际应用中常面临底物特异性不足、批次间重现性差以及缺乏针对酶固定化效应的定量评价手段等挑战。本文提出一种快速、简便且通用的电化学方法,用于测量酶固定化及共价交联对酶催化活性和底物特异性的影响。该方法适用于催化循环中释放过氧化氢(H2O2)的酶基电化学生物传感器,通过检测 H2O2 在电极表面的氧化电流来定量酶促...