ACS applied bio materials
2021
D-氨基酸氧化酶(DAAO)可结合多种 D-氨基酸且亲和力不同,因此开发具有选择性的 DAAO 酶生物传感器仍是实际应用中的挑战。本文提出一种构建具有不同底物选择性生物传感器的方法。首先,通过理性设计在 DAAO 中引入点突变,提高其对 D-丝氨酸的选择性。随后,对野生型酵母 DAAO(RgDAAO WT)以及人源 DAAO W20...
ACS sensors
2021
Vongsouthi V, Whitfield JH, Unichenko P, Mitchell JA 等 13 人
溶质结合蛋白(SBP)在配体结合亲和力、热稳定性与构象变化之间形成平衡,可用于小分子运输、传感与趋化。尽管SBP的配体诱导构象变化使其适合作为生物传感器元件,但对其进行蛋白质工程改造难度较大。本研究通过理性设计与计算设计,将一种D-丙氨酸特异性SBP改造为对信号分子D-丝氨酸具有选择性的荧光传感器D-serFS。该传感器通过结合位点...
Analytical and bioanalytical chemistry
2021
Moussa S, Chhin D, Pollegioni L, Mauzeroll J
酶基电化学生物传感器在实际应用中常面临底物特异性不足、批次间重现性差以及缺乏针对酶固定化效应的定量评价手段等挑战。本文提出一种快速、简便且通用的电化学方法,用于测量酶固定化及共价交联对酶催化活性和底物特异性的影响。该方法适用于催化循环中释放过氧化氢(H2O2)的酶基电化学生物传感器,通过检测 H2O2 在电极表面的氧化电流来定量酶促...
Biosensors
2018
Campos-Beltrán D, Konradsson-Geuken Å, Quintero JE, Marshall L
D-丝氨酸是哺乳动物中枢神经系统中主要的D-氨基酸,也是内源性NMDA受体甘氨酸位点的主要共激动剂,参与突触可塑性、学习与记忆,其水平异常与精神分裂症等神经精神疾病相关。为在活体中动态监测D-丝氨酸,本文报道了一种基于陶瓷基微电极阵列(MEA)的安培法自参考D-丝氨酸检测方案。该传感器在铂记录位点上固定来自红发念珠藻(Rhodoto...
The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience
2017
Van Horn MR, Strasser A, Miraucourt LS, Pollegioni L 等 5 人
NMDA受体(NMDAR)被认为在发育神经回路连接精修中起关键作用。药理学阻断或遗传功能缺失使发育期NMDAR失活会导致拓扑轴突投射紊乱;但由于NMDAR也参与整体谷氨酸能传递,这类功能缺失实验难以区分NMDAR与一般神经活动的作用。胶质递质D-丝氨酸是NMDAR共激动剂,是NMDAR通道开放所必需,但本身不能介导神经传递。本文显示...
Analytical chemistry
2014
Polcari D, Kwan A, Van Horn MR, Danis L 等 7 人
在突触中,D-丝氨酸是N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)的内源性共激动剂,参与突触传递与可塑性,并与精神分裂症、亨廷顿病等病理状态相关。准确定量局部D-丝氨酸浓度变化对理解神经-胶质通讯至关重要。本文报道了一种盘状安培酶学生物传感器,用于检测D-丝氨酸。该传感器基于直径25 μm的铂盘微电极,表面电沉积聚间苯二胺(PPD)层,...
Amino acids
2012
Mohd Zain Z, Ab Ghani S, O'Neill RD
本文以受邀综述形式讨论一种无试剂、选择性微生物传感器作为监测神经样品中 D-丝氨酸的替代工具。该 125 μm 直径盘式生物传感器主要由 D-氨基酸氧化酶(DAAO)提供对 D-丝氨酸的立体特异性识别与催化,以及聚邻苯二胺(PPD)膜用于排斥抗坏血酸等电活性干扰物。文中给出该传感器的线性区斜率为 61±7 μA cm−2 mM−1,...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2012
Sacchi S, Rosini E, Caldinelli L, Pollegioni L
食品中 D-氨基酸可由高温、极端 pH 等加工过程或掺假、微生物污染产生,因此食品质量控制日益重要。常规食品分析需要简单、易用的方法,生物传感器常能满足要求。基于酶促立体特异性反应的生物传感器可用于检测和定量食品中的 D-氨基酸。来自酵母 Rhodotorula gracilis 的 D-氨基酸氧化酶(DAAO)具有绝对立体特异性、...