DNA甲基化由DNA甲基转移酶催化，在多种生物过程中起关键作用，因此超灵敏甲基转移酶检测对生物医学研究和临床诊断具有重要意义。传统方法常需放射性标记、昂贵设备和繁琐操作。本研究基于纳米孔技术结合DNA级联信号放大，建立了无标记、超灵敏检测DNA腺嘌呤甲基转移酶（Dam）和CpG甲基转移酶（M.SssI）的方法。设计含甲基化响应序列的...
本文提出一种基于高密度“热点”Au@SiO2阵列基底和滚环扩增（RCA）策略的新型DNA生物传感器，用于超灵敏检测CpG DNA甲基转移酶M.SssI活性。在M.SssI存在时，双链DNA（dsDNA）被甲基化，甲基化敏感内切酶HpaII不能切割，dsDNA尾端单链与padlock DNA结合并触发RCA，在Phi29 DNA聚合酶...
DNA腺嘌呤甲基化甲基转移酶（Dam MTase）在基因表达、细胞发育及肿瘤发生中发挥重要作用。现有Dam MTase活性检测方法存在成本高、检测限有限、操作复杂等不足。本文首次建立基于末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）诱导激活剂解锁CRISPR/Cpf1反式切割（TdT-IU-CRISPR/Cpf1）的快速、简便多重放大策略，并据此提...
DNA腺嘌呤甲基转移酶（Dam MTase）可催化DNA甲基化并影响基因调控，其活性检测对临床诊断和治疗具有重要意义。本研究开发了一种基于甲基化敏感切割引物触发超支滚环扩增（HRCA）的无标记荧光生物传感器，用于检测Dam MTase活性。设计了一种发夹DNA探针（HP），其茎部含有Dam MTase特异性识别序列，作为甲基化底物。...
三硒化二锑（Sb2Se3）是一种 p 型半导体，具有窄带隙和优良光电性能，但此前未用于构建光电化学（PEC）生物传感器。本研究将 Sb2Se3/氧化石墨烯（GO）纳米杂化材料同时作为 PEC 探针和生物分子偶联基底，提出一种基于金纳米粒子（Au NPs）猝灭的“信号关闭”夹心型 PEC 生物传感器，用于检测 DNA 甲基转移酶（Da...
DNA甲基化由DNA甲基转移酶（MTase）催化，与多种疾病发生相关，监测MTase活性对疾病诊断和药物筛选具有重要意义。本文开发了一种简便方法合成生物相容性转化酶修饰金属有机框架（Invertase/MOF）材料，并首次将其用于构建双响应Dam MTase传感器。该材料作为信号探针，其中高密度金属位点可被电化学检测，转化酶可将蔗糖...
DNA甲基化由DNA甲基转移酶（MTase）催化，是调控基因表达的重要表观遗传过程；MTase异常水平常被视为癌症生物标志物或细菌感染迹象。本文开发了一种新型比色方法，利用DNA模板Ag/Pt双金属纳米簇（NCs）的类过氧化物酶活性检测M.SssI MTase活性，无需限制性内切酶。该方法基于TMB-H2O2体系中过氧化物酶反应的抑...
DNA 甲基化由甲基转移酶催化，在多种生物过程中发挥关键作用，但开发高灵敏度、简便且可靠的 DNA 甲基转移酶（MTase）活性评价方法仍具挑战。本文报道了一种基于多功能碳氮化物纳米片（CNNS）的三明治组装电化学发光（ECL）生物传感器，用于评价 Dam MTase 活性。CNNS 不仅可作为优良基底，通过固定大量发夹探针 DNA...
DNA四面体纳米结构因高度刚性和多功能性，常被用于生物传感系统。本文开发了一种新型多功能纳米结构，作为“off-on”荧光探针用于检测目标DNA甲基转移酶活性。该体系整合了DNA四面体、靶标识别序列和双标记报告元件。初始状态下，荧光团与淬灭剂距离很近，荧光被猝灭，体系处于“OFF”状态。当底物被目标甲基转移酶识别后，DNA四面体在S...
DNA甲基转移酶（MTase）活性与癌症发生发展密切相关。本文报道一种基于DNA超结构的电化学方法，以M.SssI为例实现DNA甲基转移酶活性的信号放大检测。首先，在金电极表面固定巯基己醇（MCH），形成低密度自组装层，再固定硫醇化DNA双链。无DNA超结构时，该双链可被BstUI限制性内切酶切割；当M.SssI催化CpG甲基化后，...
本文开发了一种利用个人血糖仪（PGM）便携易用优势，高灵敏、高选择性地检测M.SssI CpG甲基转移酶（M.SssI MTase）活性的简单方法。DNA-转化酶共轭物与预先固定在磁珠上的互补DNA杂交形成双链，其中5′-CCGG-3′序列同时作为Hpa II限制性内切酶和M.SssI MTase（识别5′-CG-3′）的识别位点。...
本文构建了一种高灵敏的电化学DNA甲基转移酶（MTase）活性检测方法，以DNA-金纳米颗粒（Au NPs）网络作为信号放大单元，并采用苯二硫醇桥联实现简便组装。两条互补的硫醇化单链DNA分别修饰金纳米颗粒后杂交，自组装形成DNA-AuNPs网络；借助苯二硫醇桥，该网络通过Au-S共价键固定于金电极表面。在Dam MTase存在下，...
DNA甲基转移酶（MTase）催化DNA甲基化，与癌症和细菌疾病密切相关，其活性检测及抑制剂筛选对疾病诊断和药物研发具有重要意义。本文报道了一种基于Dpn I消化触发多聚腺苷酸（polyA）DNA与金纳米颗粒修饰玻璃碳电极（AuNPs/GCE）结合的电化学策略，用于DNA MTase和抑制剂的简便高效检测。该方法仅使用一条亚甲基蓝（...
本文基于磁性纳米颗粒协同核酸外切酶III（Exo III）辅助循环指数放大与ZnPPIX/G-四链体超分子结构，建立了一种用于DNA甲基转移酶活性的荧光磁性生物传感器。首先，将四链体形成寡核苷酸与分子信标杂交形成的双链DNA探针通过生物素-链霉亲和素作用组装在磁性纳米颗粒（MNPs）表面作为报告探针。含GATC序列的发夹探针（HP）...
DNA甲基化在基因调控和多种疾病（尤其癌症）中具有重要作用，其催化酶DNA甲基转移酶（MTase）活性检测具有重要意义。本文报道了一种可见光激活的光电化学生物传感器，用于检测DNA MTase活性。该传感器以氧化铋碘（BiOI）纳米片作为光活性电极材料，以M. SssI MTase作为甲基化试剂，以甲基结合域蛋白（MBD1）作为甲基...
本文报道了一种基于活性基团探针（ABP）的比色生物传感器平台，用于检测具有活性的 DNA 甲基转移酶/糖基化酶。该传感器利用 DNA-金纳米颗粒（AuNP）探针，通过目标酶对 ABP 的机制性共价捕获，使固定在 AuNP 表面的 DNA 探针末端受到保护，从而抵抗外切酶 I 和 III（Exo I/III）的降解。由于 DNA 修饰...
本文报道一种新型电化学生物传感器，用于DNA甲基转移酶（MTase）活性及其抑制剂检测。该传感器基于甲基化敏感切割激活引物，随后由末端转移酶（TdTase）介导生物素化dUTP延伸，并通过酶促放大实现敏感检测。以DNA腺嘌呤甲基转移酶（Dam MTase）为模型，3'-巯基发夹DNA探针自组装于金电极表面作为底物；Dam MTase...