Genetically Encoded Biosensor-Based Screening for Directed Bacteriophage T4 Lysozyme Evolution.

International journal of molecular sciences 2020

溶菌酶是研究蛋白质结构与功能关系的经典模型蛋白，近期也被用于加速以细菌为主的二级污泥降解，但针对溶菌酶工程化的高通量筛选系统尚未见报道。本文建立了一种基于遗传编码生物传感器的T4溶菌酶（T4L）筛选系统。作者将T4L基因克隆至araBAD启动子（PBAD）控制的质粒中，并在大肠杆菌DH5α中实现可溶性表达，且未对细胞生长产生毒性。进...

全细胞生物传感器 T4溶菌酶遗传编码生物传感器定向进化高通量筛选

Acclimation of bacterial cell state for high-throughput enzyme engineering using a DmpR-dependent transcriptional activation system.

Scientific reports 2020 Kwon KK, Yeom SJ, Choi SL, Rha E 等 8 人

基于遗传电路的生物传感器已成为合成生物学中筛选新型生物催化剂和代谢途径的有效分析工具。σ54 依赖性转录因子（TF）相较于多数管家型 σ70 转录因子具有本底沉默特性，可作为此类生物传感器的有价值元件。本文表明，σ54 依赖性 TF 的独特性质可用于调控宿主细胞状态，使其更适合高通量筛选。作者利用鸟苷（五）四磷酸（(p)ppGpp）...

全细胞生物传感器 遗传电路DmpRσ54酶工程