Design and evaluation of engineered protein biosensors for live-cell imaging of EGFR phosphorylation.
活细胞荧光显微镜广泛用于研究受体介导的细胞信号动态,但可用的胞内生物传感器有限。基于磷脂酶C-γ1(PLCγ1)串联SH2域的tSH2-WT曾被用于检测表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化。本文发现tSH2-WT对磷酸化EGFR缺乏特异性,且其EGF刺激的膜募集动力学与EGFR磷酸化预期不一致。数学模型和实验表明,tSH2-WT的高亲...