Design and evaluation of engineered protein biosensors for live-cell imaging of EGFR phosphorylation.

Science signaling 2019 Tiruthani K, Mischler A, Ahmed S, Mahinthakumar J 等 6 人

活细胞荧光显微镜广泛用于研究受体介导的细胞信号动态，但可用的胞内生物传感器有限。基于磷脂酶C-γ1（PLCγ1）串联SH2域的tSH2-WT曾被用于检测表皮生长因子受体（EGFR）磷酸化。本文发现tSH2-WT对磷酸化EGFR缺乏特异性，且其EGF刺激的膜募集动力学与EGFR磷酸化预期不一致。数学模型和实验表明，tSH2-WT的高亲...

荧光生物传感器 EGFR磷酸化活细胞成像SH2域Sso7d支架

Design Principles for SuCESsFul Biosensors: Specific Fluorophore/Analyte Binding and Minimization of Fluorophore/Scaffold Interactions.

Journal of molecular biology 2016 de Picciotto S, Dickson PM, Traxlmayr MW, Marques BS 等 12 人

量化蛋白在活系统中的位置与浓度对理解其功能至关重要。SuCESsFul（支架偶联环境敏感荧光团）生物传感器将分析物识别与荧光信号转导整合于同一分子，可在高时空分辨率下检测目标蛋白，但其开发长期依赖大量经验筛选。作者系统表征了超过400种由不同蛋白分析物、结合支架和环境敏感荧光团组成的传感器，发现仅少数组合具有大于2倍的荧光动态范围。...

荧光生物传感器 SuCESsFul生物传感器环境敏感荧光团蛋白工程定向进化