ERK1/2在细胞死亡中的作用仍不清楚，尽管其动态调控对细胞命运决定具有重要意义。为阐明ERK1/2如何参与两种程序性死亡程序，作者在L929细胞中研究了hFasL诱导的凋亡和TNF诱导的坏死性凋亡过程中的ERK1/2信号动态。结果显示，抑制ERK1/2可增强凋亡敏感性，但延迟坏死性凋亡。利用改进的ERK1/2生物传感器EKAR4....
异常激活的激酶信号通路驱动髓母细胞瘤（MB）侵袭与播散，多数促瘤激酶通路汇入 MAPK-ERK1/2 通路，但 MB 细胞侵袭过程中 ERK1/2 激活状态及其作用尚不清楚。作者建立用于 MAPK-ERK1/2 通路的合成激酶激活重定位传感器（SKARS/ESKARS），在 MB 细胞中实时测量药物反应，并采用 3D 侵袭实验和小脑...
G蛋白偶联受体（GPCR）通过偶联异源三聚体G蛋白和arrestin调控多种胞内信号。DRY基序突变体常被用作不能偶联G蛋白的工具，以分离arrestin依赖、G蛋白非依赖信号。本研究构建组胺1受体（H1R）DRY/AAY突变体，并纳入血管紧张素II 1型受体（AT1AR）DRY突变体，利用多种活细胞FRET生物传感器检测arres...
生物传感器已广泛用于在活细胞中实时捕获信号事件，并在G蛋白偶联受体（GPCR）药物筛选中评估偏向信号和变构效应。然而，将同一传感器直接移植到不同细胞类型或不同亚细胞区室时，其输出可能受细胞背景、受体表达水平和定位影响，从而造成对药物效应的误判。本文以核定位BRET型ERK1/2传感器为例，讨论如何缓解这些问题。该传感器由Renill...
血管紧张素II 1型受体（AT1R）不仅作为G蛋白偶联受体，还可作为机械传感器，通过β-arrestin依赖途径传递信号。本研究利用β-arrestin2偏向激动剂作为构象探针，在药理学和生物物理实验中检验机械拉伸是否稳定AT1R特有的β-arrestin激活构象。在表达AT1R-β-arrestin2融合蛋白的细胞中，渗透压拉伸提...
低温和低温预处理具有显著心肌保护作用，但其分子机制尚未完全阐明。本研究在分离成年大鼠心室肌细胞中发现，16°C 温度预处理可增强氧化应激后收缩功能恢复并防止钙稳态紊乱。低温预处理通过延迟线粒体通透性转换孔（mPTP）的病理性开放而维持线粒体功能，但短暂 mPTP 闪烁未改变。作者首次证明线粒体活性氧（ROS）仅在温度预处理的低温阶段...