丙烯酸（AA）是一种广泛使用的商品化学品，传统上由不可再生化石燃料来源制备。为发展绿色生物基丙烯酸生产，需要能够快速、简便检测活细胞内 AA 生成的传感工具。本研究开发了一种新型转录生物传感器，用于在体内检测丙烯酸。通过对暴露于亚致死剂量丙烯酸的大肠杆菌进行 RNA-seq 分析，鉴定到一个选择性响应启动子 PyhcN，并将其克隆至...
丙酮酸羧化酶（PCx）是回补三羧酸循环的二氧化碳固定酶，在糖碳源生长过程中以草酰乙酸补充循环中间物。本研究利用赖氨酸生物传感器 pSenLys-Spc，在谷氨酸棒杆菌中筛选能够提高葡萄糖来源 L-赖氨酸产量的丙酮酸羧化酶变体。作者将经错误倾向 PCR 构建的 pyc 基因库转入合适的报告菌株，并通过荧光激活细胞分选（FACS）筛选胞...
细菌能够感知环境中特定分子并触发相应代谢反应，是重要的生物技术资源。尽管许多介导该过程的转录因子（TF）已被研究，但仅少数被用于分子生物学应用。为扩展具有生物技术价值的生物传感器库，本文提出一种构建和测试嵌合 TF 库的策略，其核心是将高溶解性周质结合蛋白（PBP）与 DNA 结合域（DBD）融合，形成可识别小分子并调控转录的嵌合调...
本研究对大肠杆菌 lac 操纵子阻遏蛋白 LacI 的效应物结合特异性进行工程改造。基于 LacI 饱和突变文库，采用流式细胞分选（FACS）正负双筛选策略，获得突变体 LacI-L5。该突变体能被乳果糖特异性诱导，而乳糖、表乳果糖、麦芽糖、蔗糖、纤维二糖和蜜二糖等双糖均不能诱导其表达。基于 LacI-L5 构建了全细胞乳果糖生物传...
单细菌细胞中特定代谢物的检测与定量是工业生物技术的重要目标。本研究开发了一种基于谷氨酸棒杆菌转录调控因子 Lrp 的全细胞生物传感器，用于检测胞内 L-甲硫氨酸（L-Met）及支链氨基酸 L-缬氨酸（L-Val）、L-亮氨酸（L-Leu）和 L-异亮氨酸（L-Ile）。该传感器将 lrp 基因、lrp-brnF 间区启动子与增强型黄...