Genetically Encoded FRET-Based Tension Sensors.
遗传编码的 FRET（Förster 共振能量转移）张力传感器可测量活细胞或完整生物体中单个分子上的皮牛级力学张力。这类生物传感器在无张力时具有相对较高的 FRET 效率，当施加力时 FRET 效率迅速下降。本文描述如何针对特定目标蛋白构建此类传感器，并讨论用于确认所观察到的 FRET 效率差异确实反映分子张力变化的对照实验。由于所...
Improving Quality, Reproducibility, and Usability of FRET-Based Tension Sensors.
机械生物学关注机械力如何影响细胞行为，而 Förster 共振能量转移（FRET）张力传感器可通过发射光变化测量蛋白质上的分子尺度力。然而，这类传感器的测量可靠性与可重复性尚未被充分检验。本文针对敏化发射成像，开发了提高测量精度的数值方法，用于更准确地估计 FRET 效率校准常数。作者以 vinculin 张力传感器（VinTS）为...
A Kinesin-5, Cin8, Recruits Protein Phosphatase 1 to Kinetochores and Regulates Chromosome Segregation.
有丝分裂中，纺锤体微管必须正确附着于动粒以确保染色体精确分离。酿酒酵母 Kinesin-5 马达 Cin8 在前期至中期高度富集于动粒，但其功能长期不明。本研究通过定量荧光显微镜、动粒免疫沉淀、AID 降解和 FRET 张力传感器发现，Cin8 以细胞周期依赖方式定位到动粒，其定位依赖 Ndc80 复合物、动粒微管和 Dam1 复合...
Spatial distribution of cell-cell and cell-ECM adhesions regulates force balance while main-taining E-cadherin molecular tension in cell pairs.
细胞-细胞与细胞-细胞外基质（ECM）黏附之间的力学耦联调控胚胎发育和组织稳态中的细胞形态变化。本研究利用ECM微图案化改变MDCK细胞对的铺展面积和长宽比，驱动不同细胞骨架应变能状态和细胞牵引力，并采用FRET张力生物传感器检测E-钙黏蛋白分子张力。结果显示，连续周边ECM黏附使细胞-细胞和细胞-ECM力随铺展面积增加而增大；将E...
Construction, imaging, and analysis of FRET-based tension sensors in living cells.
随着机械刺激在生物学过程中重要性日益受到重视，测量活细胞内特定蛋白所受力成为研究热点。基于 Förster 共振能量转移（FRET）的分子张力传感器使这类研究成为可能，并帮助揭示细胞感知和响应周围机械环境的机制。构建和使用 FRET 张力传感器的流程可分为构建、成像与分析三部分。本文首先综述多种遗传编码 FRET 张力传感器的构建方...
Fluid shear stress on endothelial cells modulates mechanical tension across VE-cadherin and PECAM-1.
血流产生的流体剪切应力（FSS）通过内皮细胞连接机械传感复合体调控血管发育、血压和动脉粥样硬化。既往研究提示 PECAM-1 在流动中受力并启动信号，但机制不清。本研究基于已建立的 FRET 张力生物传感器，开发并验证了 VE-cadherin 和 PECAM-1 的 FRET 张力探针。静态培养中，细胞连接处 VE-cadheri...