Analytical chemistry
2021
Luque-Uría Á, Peltomaa R, Nevanen TK, Arola HO 等 7 人
霉酚酸(MPA)是常用于预防器官移植排斥反应的免疫抑制剂,因其治疗窗窄而需监测。本研究利用噬菌体展示肽库筛选能结合MPA特异性重组抗体片段(Fab)并模拟MPA行为的环肽。经生物筛选后分离多个噬菌体展示肽,并在噬菌体竞争性免疫分析中验证其表位模拟特性。确定最佳MPA模拟肽ACEGLYAHWC(含二硫键约束环)后,测试多种免疫分析方案...
Analytical chemistry
2021
Takahashi R, Yasuda T, Ohmuro-Matsuyama Y, Ueda H
淬灭抗体(Q-body)是由位点特异性标记荧光染料的抗体片段构成的免疫传感器。无抗原时,染料主要被抗体可变区色氨酸残基通过光诱导电子转移淬灭;加入抗原后,染料从抗体分子中释放,荧光恢复,从而实现简单快速的抗原检测。本研究将发光酶 NanoLuc(Nluc)融合到 Q-body,构建基于生物发光共振能量转移(BRET)的新型免疫传感器...
International journal of molecular sciences
2021
Altamash T, Ahmed W, Rasool S, Biswas KH
细胞内离子强度通过调节蛋白质活性、聚集、相分离和细胞体积等过程,影响细胞存活与增殖,并可因离子通道活性或微环境渗透压改变而变化,因此需要实时监测工具。本文开发了一种基于 NanoLuc 荧光素酶的生物发光细胞内离子强度传感策略。重组纯化蛋白实验表明,NanoLuc 生物发光在宽范围缓冲液离子强度条件下具有离子强度依赖性;高离子强度下...
Biosensors & bioelectronics
2021
Alsulami T, Nath N, Flemming R, Wang H 等 6 人
与传统异相检测相比,均相免疫检测因操作简便而更具优势。本研究基于工程化发光蛋白NanoLuc两个亚基的结合,开发了一种用于检测伏马毒素B1(FB1)的均相发光免疫检测方法(FNanoBiT assay)。将抗伏马毒素抗体偶联至NanoLuc大亚基LgBiT,形成FLgBiT;将FB1偶联至小亚基SmBiT,形成FSmBiT。在竞争免...