Dysregulated NAD(H) homeostasis associated with ciprofloxacin tolerance in
抗生素持久性（亚群耐受）指抗生素敏感菌中部分细胞在杀菌浓度抗生素长期暴露后存活，并在抗生素去除后可再生长，可导致疗程延长、感染复发和遗传耐药加速。目前尚无能在抗生素暴露前将耐受细胞从总体中分离的生物标志物。已有研究表明持久者常存在胞内氧化还原稳态紊乱，因此本研究采用 Peredox [NADH:NAD+] 荧光生物传感器，在单细胞水...
Live cell imaging of cytosolic NADH/NAD
脂肪肝是美国最常见的慢性肝病，可由酒精或代谢综合征引起。酒精在肝细胞胞质中被醇脱氢酶(ADH)氧化，生成NADH并使胞质NADH/NAD+比值升高，该变化可能与脂肪肝发生有关，但现有生化或自荧光方法难以在活功能肝细胞中直接、动态测定游离胞质比值。本研究利用遗传编码荧光传感器Peredox，在分离的大鼠肝细胞和HepG2细胞中转染表达...
Investigation of the NADH/NAD
Ralstonia eutropha 是一种可氧化氢的细菌，能在异养与自养代谢之间切换，因而适用于生物氢生产、可降解聚合物和烃类等生物技术。其 H2 氧化在 O2 存在下由四种氢化酶介导，其中可溶氢化酶（SH）可逆地耦合 H2 氧化与 NAD+ 还原为 NADH，并已在体外和体内用于辅因子再生，因此 SH 与细胞 NADH/NAD+...
Cytosolic NADH-NAD(+) Redox Visualized in Brain Slices by Two-Photon Fluorescence Lifetime Biosensor Imaging.
细胞质 NADH-NAD+ 氧化还原状态是细胞代谢的核心指标，也是活细胞中葡萄糖与乳酸代谢的重要反映。本文报道遗传编码荧光生物传感器 Peredox 在 NADH:NAD+ 比值传感范围内具有显著的荧光寿命变化，因此可利用具备荧光寿命成像功能的双光子扫描显微镜（2p-FLIM）和时间相关单光子计数（TCSPC）在活细胞中可视化细胞质...
Imaging cytosolic NADH-NAD(+) redox state with a genetically encoded fluorescent biosensor.
NADH 是电子传递中的关键代谢辅因子，但在活细胞胞质中对其进行敏感、特异检测一直困难。作者将环化置换绿色荧光蛋白 T-Sapphire 与细菌 NADH 结合蛋白 Rex 结合，构建了胞质 NADH-NAD+ 氧化还原状态的荧光生物传感器。初始构建报告 [NADH]×[H+]/[NAD+]，通过定点突变消除其 pH 敏感性。工程化...