Quantitative ratiometric imaging of FRET-biosensors in living cells.
基于 Förster 共振能量转移(FRET)的生物传感器可用于在活细胞中以亚细胞分辨率和秒级时间尺度解析蛋白激活事件的动态过程,这些过程难以用传统生化和细胞生物学方法直接观察。本文系统介绍将 FRET 生物传感器原始图像数据转化为相对比率定量测量的基本图像处理流程,重点讨论遗传编码单链 FRET 传感器以及分子间双链设计系统的处理...
基于 Förster 共振能量转移(FRET)的生物传感器可用于在活细胞中以亚细胞分辨率和秒级时间尺度解析蛋白激活事件的动态过程,这些过程难以用传统生化和细胞生物学方法直接观察。本文系统介绍将 FRET 生物传感器原始图像数据转化为相对比率定量测量的基本图像处理流程,重点讨论遗传编码单链 FRET 传感器以及分子间双链设计系统的处理...
本文提出一种基于波动分析的 FRET 生物传感器检测方法,用于在活细胞中同时测量蛋白质的分子流与信号活性。作者将荧光寿命成像显微镜(FLIM)的相量(phasor)分析与沿毫秒级线扫描获取的交叉对关联函数(cross-pCF)分析相结合,检测 Rho GTPase 活性(即 FRET 生物传感器信号)的空间定位,并解析该活性群体所采...