Rho GTPase isoforms in cell motility: Don't fret, we have FRET.
Rho家族p21小GTP酶直接调控基于肌动蛋白的运动机器，在细胞迁移控制中起关键作用。除经典且研究最充分的RhoA、Rac1和Cdc42外，这些关键蛋白的多个亚型已被鉴定，并显示在多种细胞运动过程中具有特定功能。研究亚型特异性效应的主要困难在于，各亚型一级氨基酸序列高度相似，因此可与相同上游调控因子和下游效应靶点相互作用。本文介绍各...
A High-Content Assay for Biosensor Validation and for Examining Stimuli that Affect Biosensor Activity.
生物传感器可用于在体内监测多种蛋白行为，但新传感器的开发与表征往往耗时费力。在传感器设计过程中，需要评估不同结构对特异性、亮度和荧光响应的影响。本文描述一种在 96 孔板格式下使用自动化显微镜进行生物传感器验证的高通量方法。该方法将生物传感器与能够刺激或抑制其报告活性的上游蛋白共表达，从而确定传感器最大激活态与失活态之间的差异，并考...
A new genetically encoded single-chain biosensor for Cdc42 based on FRET, useful for live-cell imaging.
Cdc42 是调控细胞极性、细胞骨架重排、迁移和膜转运等多种形态发生过程的关键小 GTP 酶，其激活动态需精确调控。为在活细胞中直接观察 Cdc42 激活，作者开发并验证了一种新的 Cdc42 激活生物传感器。该传感器为遗传编码、单链设计，可正确定位到膜区室，并能与其上游调控因子鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子（GDI）相互作用。作者在小鼠...