Nitric Oxide Sensing by a Blue Fluorescent Protein.
半胱氨酸残基的 S-亚硝基化是多种蛋白质动态翻译后调控和氧化还原调节的重要机制。许多荧光蛋白（FP）含有半胱氨酸，GFP 衍生荧光蛋白中两个高度保守的 Cys 残基为发色团自催化形成提供有利微环境。尽管荧光蛋白 25 年来一直是细胞生物学工具，但一氧化氮（NO）对其荧光性质的影响此前未被研究。本文考察蓝色发射荧光蛋白 mTagBFP...
Nitric Oxide Activates β-Cell Glucokinase by Promoting Formation of the "Glucose-Activated" State.
胰腺β细胞胰岛素分泌受胰高血糖激酶（GCK）活性严格调控，GCK将β细胞代谢与血糖变化耦联。尽管GCK仅有一个葡萄糖结合位点，却表现出葡萄糖正协同性；体外结构研究鉴定出多种酶活性不同的构象，但活细胞如何调控GCK协同性仍不清楚。为理解GCK激活的细胞调控，作者开发了同源转移FRET-GCK生物传感器，并用偏振显微镜消除FRET定量中...
Regulation of Glucokinase by Intracellular Calcium Levels in Pancreatic β Cells.
葡萄糖激酶（GCK）控制胰β细胞葡萄糖代谢速率，是胰岛素分泌的限速步骤。GCK 的翻译后激活可由 G 蛋白偶联受体或受体酪氨酸激酶通路刺激，提示存在共同机制。本研究显示，抑制内质网（ER）Ca2+ 释放可使 GCK 激活与受体刺激解耦；药理学释放 ER Ca2+ 可刺激 GCK 光学生物传感器激活并增强葡萄糖代谢，表明胞质 Ca2+...