磷酸兰（PLB）是调节心肌肌浆网钙泵（SERCA）的跨膜微肽，但其物理机制仍不清楚。PLB 降低活性 SERCA 对 Ca2+ 的敏感性，提高泵循环所需 Ca2+ 浓度；但在无 ATP 时 PLB 并不降低 SERCA 的 Ca2+ 结合，提示其并非直接抑制 Ca2+ 亲和位点。传统解释认为 PLB 减慢与 Ca2+ 结合相关的酶循...
人体多个内脏沿左右轴不对称发育，早期胚胎左右不对称建立错误可导致出生缺陷。在多种脊椎动物中，纤毛通过左右组织者（LRO）产生定向液流，触发不对称信号以决定左右轴。斑马鱼胚胎中，背侧前体细胞（DFC）发育为具纤毛的Kupffer囊（KV），作为LRO；DFC有丝分裂增殖是形成功能性KV的关键步骤。本研究开展靶向药理学筛选，鉴定调控DF...
本研究建立了一种稳健的高通量筛选（HTS）策略，用于发现靶向肌浆/内质网钙ATP酶（SERCA）的小分子效应物。该策略基于荧光微孔板读取器，可同时高精度、高速记录纳秒荧光衰减波形（寿命模式）与完整发射光谱（光谱模式）。作者利用光谱解混微孔板读取器（SUPR），在活细胞中表达荧光共振能量转移（FRET）生物传感器，筛选小分子化合物库。...
我们开发了一种可在真实高通量筛选（HTS）条件下逐孔记录完整高质量荧光发射光谱的微孔板读数仪，整板384孔读取时间少于3分钟。该仪器特别适合基于荧光共振能量转移（FRET）的活细胞检测。在HEK293细胞中稳定表达并研究了两色SERCA（2CS）分子内FRET生物传感器，其绿色荧光蛋白（GFP）供体与红色荧光蛋白（RFP）受体位于对...
分子建模与模拟是结构生物学中用于提出功能假说和解释光谱实验的重要工具。本文描述一种构建荧光融合蛋白计算机模型的方法：将青色荧光蛋白（CFP）连接至肌浆/内质网钙ATP酶（SERCA）的执行域，形成 CFP-SERCA 融合蛋白。该 CFP-SERCA 构建体是一种生物传感器，可报告 SERCA 胞质头部在钙结合等过程中的结构动态。作...