Detection of phasic dopamine by D1 and D2 striatal medium spiny neurons.
纹状体中多巴胺的阶段性释放决定奖励学习与动作选择，但其对胞内信号动态的影响仍不清楚。本研究在小鼠纹状体脑片中利用基因编码 FRET 生物传感器，动态量化短暂多巴胺对 cAMP 或 PKA 依赖性磷酸化水平的影响，并结合计算模型探索该信号通路。表达 D1 或 D2 多巴胺受体的中型棘突神经元（MSN）分别以 cAMP 升高或降低响应多...
Gα
背景与目的：CB1大麻素受体经典通过抑制性Gαi蛋白介导信号，但在某些条件下可经Gαs等蛋白传递信号。本研究旨在考察受体数量与配体依赖性对CB1信号的影响。实验方法：在HEK细胞中以不同水平表达CB1，采用实时BRET生物传感器CAMYEL检测cAMP，采用AlphaScreen检测磷酸化ERK；并通过匀浆与全细胞放射配体结合实验表...
FRET biosensor uncovers cAMP nano-domains at β-adrenergic targets that dictate precise tuning of cardiac contractility.
区室化cAMP/PKA信号在生理和病理过程中具有重要意义，但局部cAMP/PKA信号的性质、调控与功能仍缺乏深入理解。本文报道了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的cAMP传感器CUTie，可以前所未有的精度检测区室化cAMP。CUTie可靶向定位于质膜、肌浆网和肌丝等特定多蛋白复合物，揭示不同位点局部cAMP信号在动力学和幅度上...
FRET Microscopy for Real-Time Visualization of Second Messengers in Living Cells.
FRET（Förster 共振能量转移）显微镜是分子生物学与医学研究中用于实时监测和定量蛋白质-蛋白质相互作用及生化过程的重要工具。该技术可在完整细胞、组织乃至亚细胞区室中研究多种新型信号转导机制。典型单分子荧光生物传感器由目标分子结合域和分别位于两侧的供体与受体荧光蛋白组成；供体在单波长光激发下发射能量，可部分转移至邻近受体，使受...
Determination of biological activity of gonadotropins hCG and FSH by Förster resonance energy transfer based biosensors.
测定促性腺激素的生物活性对生殖医学和激素制剂生产至关重要。本研究建立了一种基于G蛋白偶联受体（GPCR）介导信号转导的检测方法，用于定量人绒毛膜促性腺激素（hCG）和促卵泡激素（FSH）的生物活性。活细胞中，受体特异性激活后细胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平变化由Förster共振能量转移（FRET）生物传感器蛋白TEpacVV监测；...