Detection of the First Round of Translation: The TRICK Assay.
定量荧光显微技术常用于回答基础生物学问题。单分子RNA成像方法使研究者能够在活细胞中直接观察mRNA生命周期的初始步骤,但调控mRNA翻译的动态机制仍不清楚。作者开发了一种RNA生物传感器,可在活细胞中以时空分辨方式评估单个mRNA转录本的翻译状态。TRICK(translating RNA imaging by coat prot...
定量荧光显微技术常用于回答基础生物学问题。单分子RNA成像方法使研究者能够在活细胞中直接观察mRNA生命周期的初始步骤,但调控mRNA翻译的动态机制仍不清楚。作者开发了一种RNA生物传感器,可在活细胞中以时空分辨方式评估单个mRNA转录本的翻译状态。TRICK(translating RNA imaging by coat prot...
信使核糖核酸(mRNA)在细胞内的生命周期具有高度动态性。单分子荧光显微成像技术的发展使研究者能够在活细胞中直接观察 RNA 的代谢过程,而活细胞多色 RNA 成像的进步进一步提高了对 RNA 代谢细节的解析能力。本章概述了翻译 RNA 成像衣壳蛋白敲除(TRICK)RNA 生物传感器的设计与实施方法。TRICK 利用核糖体在首轮翻...
活细胞单分子分析为基本生物学过程动力学提供了定量见解,但信使RNA(mRNA)翻译的动态过程仍未得到充分解析。作者开发了一种基于荧光显微镜的RNA生物传感器技术,用于报告单个mRNA分子的首轮翻译事件。该技术利用正交噬菌体PP7和MS2茎环分别标记报告转录本的编码区和3′非翻译区,并分别结合带核定位序列的PP7衣壳蛋白-GFP(NL...