组成图示
示意图生成中
传感器类型
荧光生物传感器
检测对象
牛血清白蛋白（BSA）、人血清白蛋白（HSA）、γ-球蛋白（γ-Globulin）；样品基质为磷酸盐缓冲液（PBS）蛋白标准溶液，文中提及可应用于尿液白蛋白筛查
检测原理
chrysene 为疏水性多环芳烃荧光探针，可进入白蛋白的疏水口袋并结合。结合后探针微环境极性降低，荧光量子产率和寿命提高，同步荧光在短波长区出现特征峰：BSA 约 296 nm、HSA 约 294 nm、γ-G 约 301–309 nm。SFS 采用固定 Δλ=10 nm 同步扫描，使谱带变窄、背景重叠减少，从而提高选择性。随着蛋白浓度增加，可结合 chrysene 的疏水位点增多，296 nm 附近 SFS 强度近似线性增强。β-CD、CB6 或 CB7 与 chrysene 形成主客体复合物，将探针与共存金属离子隔离，减少淬灭或增强干扰，而不显著改变检出限。
检测灵敏度
LOD: 0.005 μM（BSA、γ-G）；LOD: 0.5 μM（HSA）；线性范围: 0.01–0.3 μM、0.1–3.0 μM、1.0–20.0 μM（BSA）；线性范围: 0.01–0.3 μM、0.1–3.0 μM、1.0–30.0 μM（γ-G）；线性范围: 1.0–30.0 μM（HSA）；灵敏度斜率: 1.94E6（BSA，0.01–0.3 μM，无宿主）；灵敏度斜率: 135,168.43（HSA，1.0–30.0 μM，无宿主）；灵敏度斜率: 2.25E6（γ-G，0.01–0.3 μM，无宿主）；相关系数: r=0.991（BSA，0.01–0.3 μM，无宿主）；相关系数: r=0.998（HSA，1.0–30.0 μM，无宿主）；相关系数: r=0.997（γ-G，0.01–0.3 μM，无宿主）
效应效果
该传感器对白蛋白具有良好选择性，chrysene 与 BSA/HSA/γ-G 结合后在短波长区产生特征 SFS 峰（BSA 296 nm、HSA 294 nm、γ-G 301–309 nm），可区别于常规发射/激发谱。抗干扰方面，无宿主时 CaCl2、CoCl2、FeSO4、Fe(NO3)3、HgNO3、ZnSO4 使 SFS 强度变化达 -15% 至 +35%；加入 β-CD 后分别降至 +5%、+8%、+9%、+3%、+7%、-1%，Al(NO3)3 影响很小。测量 RSD 小于 10%。作者称方法比传统分离法更快，且 LOD 0.005 μM 比已报道方法更灵敏，适用于白蛋白快速筛查。
传感器的构成
- 样品介质：磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.0），维持蛋白与探针稳定并稀释样品
- 荧光探针：chrysene（多环芳烃），作为识别-信号分子，结合白蛋白后同步荧光增强
- 超分子宿主：β-环糊精（β-CD）、葫芦[6]脲（CB6）或葫芦[7]脲（CB7），与 chrysene 协同结合，隔离金属离子干扰
- 被测蛋白：牛血清白蛋白（BSA）、人血清白蛋白（HSA）或 γ-球蛋白（γ-G），与 chrysene 疏水结合，引起 SFS 峰变化
- 信号读出：同步荧光光谱仪（SFS，JOBIN YVON Horiba Fluorolog 3），固定 Δλ=10 nm，读取 296 nm 附近强度
中文摘要
本文开发了一种基于同步荧光（SFS）探针的白蛋白测定生物传感器，用于高灵敏度、高选择性地定量白蛋白。与常规荧光发射或激发光谱测量不同，SFS 在 chrysene 与蛋白结合后于较短波长区产生一个特有的同步荧光峰，使白蛋白的识别和定量更加简便。研究考察了荧光探针 chrysene 在超分子宿主–蛋白组装体中的协同结合行为，并比较了 β-环糊精（β-CD）、葫芦[6]脲（CB6）和葫芦[7]脲（CB7）等宿主分子对白蛋白测定的影响。结果表明，这些超分子宿主分子对白蛋白测定的灵敏度或检出限影响很小，但能显著降低多种共存金属离子淬灭剂/增强剂造成的干扰。该方法对牛血清白蛋白（BSA）和 γ-球蛋白（γ-Globulin）的检出限为 0.005 μM，灵敏度优于已报道方法。
英文摘要
A synchronous fluorescence probe based biosensor for estimation of albumin with high sensitivity and selectivity was developed. Unlike conventional fluorescence emission or excitation spectral measurements, synchronous fluorescence measurement offered exclusively a new synchronous fluorescence peak in the shorter wavelength range upon binding of chrysene with protein making it an easy identification tool for albumin determination. The cooperative binding of a fluorescence probe, chrysene, in a supramolecular host-protein assembly during various albumin assessments was investigated. The presence of supramolecular host molecules such as beta-cyclodextrin, curucurbit[6]uril or curucurbit[7]uril have little influence on sensitivity or limit of detection during albumin determination but reduced dramatically interference from various coexisting metal ion quenchers/enhancers. Using the present method the limit of detection for BSA and gamma-Globulin was found to be 0.005 microM which is more sensitive than reported values.