压电(QCM)生物传感器 2012

Piezoelectric detection of bilirubin based on bilirubin-imprinted titania film electrode.

Analytical biochemistry Yang Z, Yan J, Zhang C
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组成图示

Piezoelectric detection of bilirubin ... 传感器构成示意图

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传感器类型

压电(QCM)生物传感器

检测对象

胆红素(bilirubin, BR);样品基质:血清(serum),实验中也使用磷酸盐缓冲溶液。

检测原理

传感器以胆红素印迹二氧化钛薄膜作为识别层。在pH 8.0条件下,二氧化钛表面主要呈>Ti-OH,胆红素主要以B-形式存在,二者通过氢键等相互作用进入印迹空腔并特异性结合。结合事件使石英晶体表面质量增加,根据压电石英晶体微天平的Sauerbrey效应,共振频率随吸附质量增加而下降。该过程无需酶、抗体或荧光标记,直接以频率变化反映胆红素浓度。在0.1–50 μM范围内,频率变化与浓度呈线性关系,线性方程为y (Hz) = -157.4 - 91.8 [bilirubin] (μM),R = 0.9988。

检测灵敏度

LOD: 0.05 μM (S/N = 3);线性范围: 0.1–50 μM;线性方程: y (Hz) = -157.4 - 91.8 [bilirubin] (μM);R = 0.9988, n = 8

效应效果

该传感器对胆红素具有较高选择性。与胆绿素、胆固醇和睾酮相比,印迹薄膜对胆红素的相对选择性系数分别比非印迹薄膜提高2.8、3.1和1.2倍;1.0 μM下频率变化分别为-315、-76、-37和-33 Hz。传感器重现性良好,连续9次响应后信号损失约2.9%;在连续流动和间歇使用中稳定,室温保存3个月以上仅轻微灵敏度下降。血清加标回收率为96.00%–100.58%,响应时间约30 min,检出限低于已有报道,可用于肝功能相关血清胆红素检测。

传感器的构成

  • 基底/换能器:AT-cut 9 MHz 石英晶体(QCM resonator),双面真空镀金电极,一侧用玻璃盖玻片和硅O形圈绝缘,仅工作电极暴露。
  • 修饰层:表面溶胶-凝胶法制备的胆红素印迹二氧化钛薄膜(bilirubin-imprinted titania film, BITF),由钛酸四丁酯(Ti(O-nBu)4)与胆红素模板形成,厚度约0.8 μm。
  • 识别元件:BITF 中经氨水洗脱模板形成的胆红素印迹空腔,通过氢键等与胆红素特异性结合。
  • 信号标记物:无外源标记物,采用无标记直接质量传感(label-free mass sensing)。
  • 读出系统:Q-sense QCM、TTL-IC 振荡器(IC 74LS04)、频率计(Iwatsu SC-7201)和蠕动泵(Ismatec IPC-8)组成流动检测系统。

中文摘要

本研究基于分子印迹与表面溶胶-凝胶技术,在石英晶体表面制备胆红素印迹二氧化钛薄膜,构建了一种高选择性、高灵敏度的压电石英晶体微天平(QCM)胆红素生物传感器。以钛酸四丁酯(Ti(O-nBu)4)为钛源,胆红素为模板,经浸渍-清洗-水解-干燥循环形成约0.8 μm印迹薄膜,再用氨水洗脱模板形成特异性识别空腔。胆红素结合后引起晶体表面质量增加,导致共振频率下降,从而实现无标记检测。结果表明,该传感器响应时间约30 min,线性范围为0.1–50 μM,检出限为0.05 μM,对胆红素具有较高选择性,并可用于血清样品中胆红素的测定。

英文摘要

A novel quartz crystal microbalance (QCM) sensor with a high selectivity and sensitivity has been developed for bilirubin determination, based on the modification of bilirubin-imprinted titania film onto a quartz crystal by molecular imprinting and surface sol-gel techniques. The performance of the developed bilirubin biosensor was evaluated and the results indicated that a sensitive bilirubin biosensor could be fabricated. The obtained bilirubin biosensor presents high-selectivity monitoring of bilirubin, better reproducibility, shorter response time (30 min), wider linear range (0.1-50 μM), and lower detection limit (0.05 μM). The analytical application of the bilirubin biosensor confirms the feasibility of bilirubin determination in serum sample.

关键词

胆红素石英晶体微天平分子印迹二氧化钛薄膜压电传感器血清检测