Science translational medicine
2026
Melnyk O, Muralidharan C, Duffett BE, Muncy AN 等 16 人
自噬是维持胰腺β细胞功能的关键分解代谢过程,在1型糖尿病中受损,但其在自身免疫糖尿病发生过程中的缺陷时相尚不清楚。作者构建由胰岛素/兔β珠蛋白混合启动子(RIP1)驱动、AAV8包装的mCherry-eGFP-LC3B双荧光生物传感器,实现β细胞选择性表达。通过活体双光子显微镜在时空上关联eGFP与mCherry信号,追踪自噬体与溶...
Scientific reports
2019
Reissaus CA, Piñeros AR, Twigg AN, Orr KS 等 12 人
胰腺胰岛是包含内分泌、免疫和内皮等多种细胞的复杂微型器官,离体后细胞间通讯丢失,因此糖尿病发病机制需在活体多细胞环境中研究。作者开发了一套可移植的活体显微镜平台,用于在体内研究β细胞功能。首先构建β细胞选择性病毒编码荧光蛋白生物传感器,可快速简便地导入任意小鼠;随后将其与活体显微镜结合,从活体组织获取细胞和亚细胞数据。该平台利用Gr...
Biochemistry
2018
Seckinger KM, Rao VP, Snell NE, Mancini AE 等 6 人
胰腺β细胞胰岛素分泌受胰高血糖激酶(GCK)活性严格调控,GCK将β细胞代谢与血糖变化耦联。尽管GCK仅有一个葡萄糖结合位点,却表现出葡萄糖正协同性;体外结构研究鉴定出多种酶活性不同的构象,但活细胞如何调控GCK协同性仍不清楚。为理解GCK激活的细胞调控,作者开发了同源转移FRET-GCK生物传感器,并用偏振显微镜消除FRET定量中...
ACS sensors
2017
Kalwat MA, Wichaidit C, Nava Garcia AY, McCoy MK 等 9 人
本文是对《ACS Sensors》2016年论文《胰岛素启动子驱动的海肾荧光素酶胰岛素分泌生物传感器检测用于发现β细胞葡萄糖感知通路》的更正。原文致谢部分遗漏了Welch Foundation的资助信息,现予以补充。更正说明指出,Welch Foundation资助了该项目的部分工作,资助编号分别为I1689(J.B.M.)和I12...
Cell chemical biology
2017
Schifferer M, Yushchenko DA, Stein F, Bolbat A 等 5 人
尽管胰岛素分泌检测需求迫切,目前仍缺乏可靠方法测量单个细胞胰岛素释放。作者开发了一种基因编码报告分子 RINS1,基于前胰岛素与超折叠绿色荧光蛋白(sfGFP)及 mCherry 的融合,用于监测胰岛素分泌。RINS1 在 MIN6 β 细胞中表达后可被正常加工,生成单标记胰岛素组分。出乎意料的是,葡萄糖或药物刺激 β 细胞胰岛素分...