Frontiers in bioengineering and biotechnology
2025
McNeal TA, Weinberger J, Liman GLS, Ariagno TM 等 7 人
内源肽(intein)是插入宿主蛋白中的移动遗传元件,可通过蛋白剪接反应切除自身并将相邻的 N-端外肽和 C-端外肽连接。内源肽对肽键进行特异性重排的能力在蛋白质工程中非常有用,因此控制其活性的方法备受关注。N 端切割(NTC)可用于亲和纯化后去除标签,但通常需要高于 50°C 的长时间孵育或外源亲核试剂(如二硫苏糖醇 DTT),这...
Journal of proteome research
2008
Hayano T, Yamauchi Y, Asano K, Tsujimura T 等 7 人
我们开发了一种新型自动化系统,通过整合表面等离子共振(SPR)生物传感器与高灵敏度纳流液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)来分析蛋白复合物。在哺乳动物细胞中表达同时带有 His 标签、FLAG 标签和生物素化序列的诱饵蛋白;利用 His 标签从细胞裂解液中初步纯化后,将样品蛋白混合物施加到 SPR 生物传感器上,使蛋白复合物捕获在...