ACS synthetic biology
2020
McNerney MP, Piorino F, Michel CL, Styczynski MP
无细胞系统为开发低成本、易使用的多分析物传感器提供了灵活平台,但传感器响应灵敏度受结合亲和力限制,而提高亲和力往往困难。本文围绕维生素B12这一关键微量营养素,报道了通过主动分析物导入改善生物传感器动态范围和灵敏度的策略。作者首先利用B12响应转录因子EutR在无细胞反应中实现B12依赖的GFP输出,但该无细胞传感器仅在远高于临床相...
ACS synthetic biology
2020
Ambri F, D'Ambrosio V, Di Blasi R, Maury J 等 8 人
本文报道了一种用于酵母全细胞生物传感器报告启动子的高分辨率扫描策略。作者以酿酒酵母为宿主,构建 VanO、BenO 和 PcaO 操作子在不同位置相对转录起始位点排列的启动子文库,分别由 pTEF1 或 pCYC1 启动子骨架承载,并驱动绿色荧光蛋白(GFP)报告基因表达。通过引入转录因子 VanR、BenM 和 PcaQ,研究香草...
FEMS yeast research
2020
Lengger B, Jensen MK
G蛋白偶联受体(GPCR)是人类基因组中最大的膜蛋白家族,具有保守的七次跨膜结构,广泛参与细胞内外信号感知。酿酒酵母天然表达用于糖和信息素感知的三种GPCR,其中信息素通路因易于构建和读取,被广泛用于在模式真核细胞中研究异源GPCR信号。本综述系统总结了在酵母中开展功能性GPCR研究的策略,重点讨论将异源GPCR成功表达并偶联至酵母...
Acta neuropathologica
2020
Thierry M, Boluda S, Delatour B, Marty S 等 8 人
在阿尔茨海默病中,Tau与Aβ聚集体累及依次连接的脑区。为分析轴索在病理传播中的作用,本研究在穹窿柱(PoF)中研究Tau与Aβ病变。PoF轴索主要起源于下托并投射至乳头体。作者对47例不同Braak分期(Tau)和Thal分期(Aβ)的尸检脑组织进行免疫组化分析。结果显示下托受累早于乳头体,但Tau聚集与Aβ沉积并非始终先后一致。...
Nucleic acids research
2020
Snoek T, Chaberski EK, Ambri F, Kol S 等 10 人
变构转录因子(aTFs)作为配体特异性生物传感器,可实时监测、筛选和调控细胞代谢,但其特异性及配体浓度与输出信号之间的转移函数常需优化。本文提出一种通用高通量方法,在酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae 中进化原核 aTF 的特异性和转移函数。通过对效应结合域(EBD)进行单轮错误 PCR 突变,并结合多种开关...
Biosensors & bioelectronics
2020
Guo M, Wang J, Du R, Liu Y 等 9 人
氯化汞(HgCl2)、氯化亚汞(Hg2Cl2)和氯化氨基汞(Hg(NH2)Cl)等汞污染物常存在于化妆品中。以往现场检测汞的方法受限于将不同形态汞转化为 Hg(II) 离子的复杂且危险预处理步骤。本研究基于全细胞微生物生物传感器开发了一种试纸条平台,可在无需预消化的情况下同时检测化妆品中可溶性和不溶性无机汞污染物。将组成型表达 Me...
Journal of bioscience and bioengineering
2020
Landete JM, Langa S, Escudero C, Peirotén Á 等 5 人
在肠道等复杂生态系统中检测生物活性肽具有挑战性。本研究以不产乳链菌肽的乳链球菌 Lactococcus lactis NZ9000 为宿主,构建两种新型 nisin 荧光生物报告菌:分别转入 pNZ:Nis-aFP 或 pNZ:Nis-mCherry 质粒,表达厌氧荧光蛋白 evoglow-Pp1(aFP)或红色荧光蛋白 mCher...
The Science of the total environment
2020
Rampley CPN, Whitehead PG, Softley L, Hossain MA 等 14 人
快速城市化与三角洲水系污染严重威胁饮用水、工业用水及数百万人的生计。本研究采用基于发光分子生物传感器的新技术,评估孟加拉国达卡周边 Turag、Tongi、Balu 和 Buriganga 河流的毒性。在36个采样点、中低流量条件以及 Bishwa Ijtema 节期间采集水样,结果显示细胞毒性水平较高,并伴随铝、镉、铬、铁、锌、锂...
Chemosphere
2020
Yang P, Ke C, Zhao C, Kuang Q 等 8 人
砷甲基化可通过砷挥发有效修复砷污染,但多数微生物砷挥发效率较低,可能与砷外排转运体竞争胞质 As(III) 有关。本研究在大肠杆菌中构建两类砷生物传感器,用于比较三种砷外排转运体的外排速率,并研究砷外排与砷挥发的关系。表达 arsBRP、acr3RP 或 arsBEC 的工程化 As 敏感 E. coli AW3110 相比对照具有...
Environmental science & technology
2020
Ma Z, Liu J, Li H, Zhang W 等 10 人
土壤可提取抗生素的定量对评估其生物可利用性、迁移性及生态毒理和健康风险具有重要意义。本研究建立了一种基于全细胞生物传感器检测土壤(Alfisol、Mollisol 和 Ultisol)中可提取四环素的方法。该传感器采用携带报告质粒 pMTGFP 或 pMTmCherry 的大肠杆菌 DH5α,质粒中的绿色荧光蛋白(GFP)或单体红色...
Journal of bioscience and bioengineering
2020
Wang D, Zheng Y, Fan X, Xu L 等 9 人
汞污染严重威胁人类健康,亟需低成本、稳定、高效且适用于环境与生物基质的检测技术。本研究首次将具有抗菌和抗真菌活性的可溶性色素吡咯青素(pyocyanin)作为全细胞生物传感器的视觉检测信号,并在汞离子依赖性转录激活因子 MerR 调控下对其生物合成途径进行工程化改造。当环境中存在 Hg2+ 时,MerR 二聚体结合 Hg2+ 后发生...
Journal of hazardous materials
2020
Zhu X, Wu G, Xing Y, Wang C 等 6 人
双酚A(BPA)的替代物双酚类似物可能具有内分泌干扰和健康风险,亟需快速、灵敏的毒性评价方法。本研究开发了一种基于丝网印刷电极(SPE)的无标记电化学微生物传感器,电极表面依次修饰羧基化多壁碳纳米管(MWCNTs-COOH)、电聚合罗丹明B(RhB)和原位还原金纳米粒子(AuNPs)。以鲮鱼肾细胞(CIK cells)作为生物识别元...