Analysis of protein secretion in Bacillus subtilis by combining a secretion stress biosensor strain with an in vivo split GFP assay.

Microbial cell factories 2023 Lenz P, Bakkes PJ, Müller C, Malek M 等 9 人

枯草芽孢杆菌是工业生物技术中重要的重组蛋白分泌宿主，但高效分泌仍需优化，且并非所有目标蛋白均可用活性法筛选。为此，作者开发了组合在线监测系统，包括活性非依赖的体内分裂GFP（split GFP）检测法和基于mCherry的分泌应激生物传感器。split GFP法将目标蛋白与sfGFP第11个β-折叠（GFP11）融合，使其与缺失该β...

全细胞生物传感器 枯草芽孢杆菌蛋白分泌分裂GFP检测分泌应激生物传感器

Accelerated strain construction and characterization of C. glutamicum protein secretion by laboratory automation.

Applied microbiology and biotechnology 2022 Müller C, Bakkes PJ, Lenz P, Waffenschmidt V 等 10 人

细菌蛋白分泌到培养上清可简化下游纯化，但高效分泌需要筛选信号肽与目标蛋白组合，且受表达效率和培养条件影响。本研究建立两套自动化工作流，用于谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）中腐皮镰刀菌梨孢型（Fusarium solani f. sp. pisi）角质酶的异源分泌菌株构建与高通量筛选。利用 Open...

全细胞生物传感器 实验室自动化蛋白分泌信号肽谷氨酸棒杆菌