PloS one
2019
Gräwe A, Dreyer A, Vornholt T, Barteczko U 等 17 人
生物传感器因高特异性和灵敏度,可用于饮用水中危险物质的快速可靠检测。现有许多合成生物学传感器依赖活体转基因生物,存在保质期短、使用受限和生物安全问题。为此,作者构建了一种可扩展的无细胞生物传感器:将无细胞蛋白合成(CFPS)反应体系冻干固定于纸基上,加入水样后重新水化并启动蛋白合成。体系中预表达的变构转录因子根据目标物存在与否调控 ...
Biotechnology and bioengineering
2019
Aw R, Polizzi KM
无细胞蛋白合成(CFPS)因合成生物学发展而重新受到关注,不同宿主裂解液可利用细胞内生物合成、蛋白折叠和翻译后修饰能力。本文报道了一种基于毕赤酵母(Pichia pastoris,Komagataella phaffi)的 CFPS 平台。作者构建了新型核糖体生物传感器,将核糖体相关基因启动子与 sfGFP 报告基因融合,通过流式细...
Toxicology and applied pharmacology
2018
Salehi ASM, Yang SO, Earl CC, Shakalli Tang MJ 等 8 人
许多疾病与暴露于模拟天然雌激素功能的内分泌干扰物(EDCs)有关。本文提出一种快速、可适配、便携式体外检测(RAPID)生物传感器平台,用于检测与人类雌激素受体β(hERβ)相互作用的化学物质。该传感器由别构融合蛋白组成,通过无细胞蛋白合成(CFPS)技术表达,并直接以比色响应进行测定。所得传感器成功检测了 hERβ 的已知 EDC...
Scientific reports
2017
Soranzo T, Martin DK, Lenormand JL, Watkins EB
本文报道了将无细胞蛋白合成与中子反射(NR)及电化学阻抗谱(EIS)电导测量相结合,用于研究支持脂质双分子层中膜蛋白结构与功能。作者利用无细胞表达系统,将丙型肝炎病毒(HCV)p7 病毒孔蛋白直接表达并插入由 POPC 或 asolectin 构成的支持模型脂质膜中。该方法可实现膜内高浓度蛋白表达、控制蛋白同位素组成以及调控蛋白所处...
Analytical biochemistry
2012
Yildiz AA, Knoll W, Gennis RB, Sinner EK
膜蛋白的结构与功能分析长期面临困难,因为分离和去垢剂重构常破坏蛋白完整性。本文提出一种将无细胞蛋白合成与人工膜技术相结合的新策略,用于在体外从头合成膜蛋白并维持其结构—功能完整性,同时提供稳定基质以便分析工具表征目标膜蛋白。作者以大肠杆菌细胞色素 bo3 泛醇氧化酶(Cyt-bo3)为例,无需传统细胞培养、分离和纯化,直接实现 Cy...