PloS one
2017
Vancraenenbroeck R, Kunzelmann S, Webb MR
通过调节对分析物的亲和力，扩大了基于荧光无试剂生物传感器可测 ATP 的浓度范围。该 ATP 生物传感器是由来自红假单胞菌的丙二酰辅酶A合成酶 MatB 与两个四甲基罗丹明形成的共价加合物。在结合位点引入突变以改变 ATP 结合亲和力，同时尽量保留伴随的荧光信号。利用该荧光信号测量结合位点不同区域突变的影响。突变分析显示三个变体尤其...
ACS chemical biology
2015
Vancraenenbroeck R, Webb MR
本研究开发了一种用于检测三磷酸腺苷（ATP）的无试剂荧光生物传感器。该传感器以红假单胞菌丙二酰辅酶A合成酶（RpMatB）作为蛋白支架和识别元件，并将两个5-碘乙酰胺四甲基罗丹明（5-IATR）荧光团共价标记于蛋白表面，作为信号读出元件。当Mg2+存在时，ATP与RpMatB结合诱导C端“盖”结构域旋转约20°，使两个罗丹明荧光团由...
Biosensors & bioelectronics
2011
Miranda FF, Brient-Litzler E, Zidane N, Pecorari F 等 5 人
抗体和人工抗原结合蛋白（AgBP）家族均由恒定多肽骨架支撑的一组超变（或随机化）残基位点构成，特定抗原的结合位点由这些超变残基中的部分残基形成。本文证明，可将这些家族中的任意 AgBP 转化为针对目标抗原的无试剂荧光生物传感器：先通过位点定向突变将某个对抗原结合贡献很小或不重要的超变残基突变为半胱氨酸，再将溶剂致变色荧光团偶联到该突...