mRNA Display Pipeline for Protein Biosensor Construction.
尽管蛋白生物传感器潜力巨大,其构建仍依赖试错。最直接的解决方式是采用模块化生物传感器架构,使特异性识别元件可快速生成以识别新靶标。为此,作者建立了一套工作流,利用mRNA展示从超稳定monobody结构域库中筛选针对目标蛋白的结合子,或利用核糖体展示筛选同等稳定的DARPins。随后将这些结合子整合到基于钙调蛋白-报告蛋白嵌合体的两...
尽管蛋白生物传感器潜力巨大,其构建仍依赖试错。最直接的解决方式是采用模块化生物传感器架构,使特异性识别元件可快速生成以识别新靶标。为此,作者建立了一套工作流,利用mRNA展示从超稳定monobody结构域库中筛选针对目标蛋白的结合子,或利用核糖体展示筛选同等稳定的DARPins。随后将这些结合子整合到基于钙调蛋白-报告蛋白嵌合体的两...
结核病(TB)是由结核分枝杆菌(MTB)引起的严重传染性疾病,是全球第九大致死疾病,也是单一感染因子导致的死亡首位原因。本文提出一种基于巨磁阻(GMR)的新型磁生物传感技术,用于现场检测结核分枝杆菌特异性分泌蛋白ESAT-6。该便携式高灵敏度诊断工具可快速获得结果,检出限达到pg/mL量级,有望成为结核诊断的突破。研究采用锚定重复蛋...
荧光探针是成像与分子生物学研究的重要工具。荧光激活蛋白(FAP)通常基于单链抗体片段(scFv),可激活游离时几乎不荧光的荧光素。本文报道了一类基于设计锚蛋白重复蛋白(DARPin)的新型荧光激活蛋白,称为FADA。作者通过核糖体展示筛选MG结合DARPin,并用酵母表面展示和流式分选对荧光激活能力进行定向成熟,获得FADA-321...
蛋白质工程在计算与实验工具方面的进步,催生了大量新的蛋白质结构与功能。本文对重复蛋白工程化研究进行综述,重点介绍面向分析传感器和医学成像的新型、通用、可替代结合支架的设计进展。基于分析物直接结合的分析方法、传感器和成像探针在医学研究与诊断、食品安全及国家安全中日益重要。传统亲和探针多为抗体,但商业抗体特异性不足,尤其对免疫原性弱的小...
抗体和人工抗原结合蛋白(AgBP)家族均由恒定多肽骨架支撑的一组超变(或随机化)残基位点构成,特定抗原的结合位点由这些超变残基中的部分残基形成。本文证明,可将这些家族中的任意 AgBP 转化为针对目标抗原的无试剂荧光生物传感器:先通过位点定向突变将某个对抗原结合贡献很小或不重要的超变残基突变为半胱氨酸,再将溶剂致变色荧光团偶联到该突...