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Rapid Detection of Dynamic PTEN Regulation in Living Cells Using Intramolecular BRET.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2016 Misticone S, Lima-Fernandes E, Scott MG

肿瘤抑制蛋白PTEN磷酸酶通过去磷酸化磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸,负调控PI3K/AKT通路,从而抑制细胞增殖、存活和迁移。PTEN功能异常与多种癌症相关,除基因突变外,其构象、定位、活性和稳定性等翻译后调控改变也可导致功能抑制。本文介绍一种基于分子内生物发光共振能量转移(BRET)的遗传编码生物传感器,用于在活细胞中快速监测...

Design and construction of conformational biosensors to monitor ion channel activation: A prototype FlAsH/BRET-approach to Kir3 channels.

Methods (San Diego, Calif.) 2016 Robertson DN, Sleno R, Nagi K, Pétrin D 等 6 人

离子通道在神经与肌肉兴奋性、激素分泌、骨重塑、免疫应答和细胞增殖等生理过程中发挥关键作用,靶向离子通道的药物是新型治疗剂的重要方向。本文报道了一种实时监测通道蛋白在药理学刺激下发生构象变化的方法。该方法通过监测生物发光共振能量转移(BRET)的变化来追踪通道蛋白的结构重排。为验证原理,作者以 Kir3 神经元通道为模型,构建了 10...

Designing BRET-based conformational biosensors for G protein-coupled receptors.

Methods (San Diego, Calif.) 2016 Sleno R, Pétrin D, Devost D, Goupil E 等 6 人

配体偏倚信号开始对制药行业的药物发现项目产生重要影响,并重新激发了人们对药理学效价的理解。因此,许多研究者和筛选活动现在被导向单个G蛋白偶联受体(GPCR)下游更大范围的信号反应。许多基于生物传感器的平台已被开发用于捕获信号特征。尽管我们利用这些信号特征的能力不断增强,但仍受制于信号特征可能仅针对某种细胞类型,因此我们的平台可能无法...