Current biology : CB
2018
Suzuki A, Gupta A, Long SK, Evans R 等 8 人
有丝分裂中,纺锤体微管必须正确附着于动粒以确保染色体精确分离。酿酒酵母 Kinesin-5 马达 Cin8 在前期至中期高度富集于动粒,但其功能长期不明。本研究通过定量荧光显微镜、动粒免疫沉淀、AID 降解和 FRET 张力传感器发现,Cin8 以细胞周期依赖方式定位到动粒,其定位依赖 Ndc80 复合物、动粒微管和 Dam1 复合...
Cell cycle (Georgetown, Tex.)
2014
Vandame P, Spriet C, Trinel D, Gelaude A 等 8 人
蛋白激酶A(PKA)调控细胞周期等多种细胞过程。本研究利用遗传编码的FRET生物传感器,基于AKAR衍生的AKAREV探针,在活HeLa细胞中以单细胞水平表征有丝分裂过程中PKA活性。结果显示,HeLa细胞进入中期后PKA活性显著升高,并维持至胞质分裂/末期结束。采用AKAREV T>A失活突变体和H89抑制剂验证了所测PKA活性的...
The Journal of cell biology
2012
Wurzenberger C, Held M, Lampson MA, Poser I 等 6 人
在有丝分裂纺锤体组装过程中,Aurora B 激酶参与纠错机制,使承受较低机械张力的动粒-微管连接解离。然而进入后期后,姐妹染色单体凝聚蛋白被移除导致张力下降,动粒-微管连接仍须维持。与此一致,Aurora B 在中期-后期转换时从染色体重新定位到中央纺锤体。本研究利用磷酸化 FRET 生物传感器进行 RNA 干扰筛选,鉴定出两个 ...