有丝分裂中染色体准确分离依赖染色体-纺锤体互作错误校正和纺锤体组装检查点（SAC）。激酶 MPS1 是这两个过程的关键调节因子，确保后期启动前染色体双定向。为解析 MPS1 激活的时间、空间及其调控，作者开发了高敏感、高特异的 FRET 生物传感器 MPS1sen。通过将 MPS1sen 分别锚定到动粒、着丝粒和染色质，研究发现 M...
本研究表征了一组肿瘤细胞系，发现其染色体不稳定性（CIN）与异常动粒-微管连接的高发生频率相关。若这些缺陷连接在有丝分裂后期启动前未被纠正，将导致染色体错误分离。Aurora B激酶富集于内着丝粒，参与多种动粒功能，其中包括纠错。对多个CIN细胞系的分析显示，Aurora B激酶的许多功能基本正常，且CIN细胞动粒上Aurora B...
在细胞分裂过程中，复制后的遗传物质被分配到两个子细胞，这一过程对发育中的组织形成和成体组织完整性至关重要。为保证分裂的准确性与效率，细胞利用多种调控和信号蛋白作为有丝分裂调控因子和检查点蛋白。Polo样激酶1（PLK1）是Polo样激酶家族中高度保守的关键有丝分裂调控激酶，与PLK2-5不同，PLK1特异性地在有丝分裂期调控细胞分裂...
有丝分裂期 DNA 双链断裂（DSB）会产生缺乏着丝粒的断裂染色体，若断裂片段错误分离将导致基因组不稳定。我们此前发现断裂染色体可通过 BubR1 依赖的“tether”将两个断裂端连接并忠实传递，但 BubR1 在断裂染色体上的招募与功能机制尚不清楚。本文表明，BubR1 必须与 Bub3 相互作用才能定位到 I-CreI 或激光...
Polo-like kinase 1（Plk1）是控制有丝分裂和细胞分裂的关键激酶。Plk1 在 S 期首先被招募到中心体，在 G2 晚期出现在动粒上，并在有丝分裂末期转位至中央纺锤体。Plk1 的激活需要 Aurora A 对其 T210 位点进行磷酸化，该过程依赖共因子 Bora。然而，关于 Plk1 最初在何处被激活存在争议：...
蛋白激酶A（PKA）调控细胞周期等多种细胞过程。本研究利用遗传编码的FRET生物传感器，基于AKAR衍生的AKAREV探针，在活HeLa细胞中以单细胞水平表征有丝分裂过程中PKA活性。结果显示，HeLa细胞进入中期后PKA活性显著升高，并维持至胞质分裂/末期结束。采用AKAREV T>A失活突变体和H89抑制剂验证了所测PKA活性的...
有丝分裂自19世纪80年代早期即作为细胞周期关键事件被研究，期间细胞结构发生显著变化，最终使复制后的染色体均等分配到两个子细胞。目前已有对这一复杂且高度有序细胞事件的详细描述。进入有丝分裂、核膜崩解、微管（MT）纺锤体形成、染色体附着，以及有丝分裂退出和胞质分裂等关键步骤中的许多调控因子也已被鉴定。然而，理解每个调控因子在细胞重排过...
在有丝分裂纺锤体组装过程中，Aurora B 激酶参与纠错机制，使承受较低机械张力的动粒-微管连接解离。然而进入后期后，姐妹染色单体凝聚蛋白被移除导致张力下降，动粒-微管连接仍须维持。与此一致，Aurora B 在中期-后期转换时从染色体重新定位到中央纺锤体。本研究利用磷酸化 FRET 生物传感器进行 RNA 干扰筛选，鉴定出两个 ...
cyclin B–Cdk1 激酶是大多数真核细胞进入有丝分裂的触发因子。在动物细胞中，cyclin B 在间期于细胞核与细胞质间穿梭，并在前期迅速富集于细胞核，促进核纤层解聚和核膜崩解（NEBD）。目前 cyclin B1 核内积累的直接触发机制尚不清楚，传统观点认为 Plk1 激酶通过磷酸化抑制其核输出。本研究利用一种特异性检测 ...
RCC1是Ran GTP酶唯一已知的鸟苷酸交换因子，在核质运输、纺锤体组装和核膜重建中发挥关键作用。RCC1通过DNA与组蛋白的双模式结合染色质，结合缺陷会导致染色体错误分离；apo-Ran可增强其染色质结合，但机制不清。本文证明RCC1 N端1–20氨基酸尾对DNA结合必不可少，却抑制组蛋白结合；apo-Ran显著促进RCC1与D...