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High affinity nucleotide-binding mutant of the ε subunit of thermophilic F1-ATPase.

Biochemical and biophysical research communications 2016 Kato-Yamada Y

ATP 合酶 ε 亚基对 ATP 的高特异性结合及其结合后显著构象变化,已被用于构建活细胞 ATP 荧光生物传感器。现有基于 ε 亚基的传感器亲和力多在毫摩尔至微摩尔范围,难以监测胞外或低浓度 ATP 信号。本研究对嗜热菌 F1-ATPase(TF1)ε 亚基进行定点突变,获得 R103A/R115A 突变体,并通过荧光滴定和动力学...

Subunit and small-molecule interaction of ribonucleotide reductases via surface plasmon resonance biosensor analyses.

Protein engineering, design & selection : PEDS 2010 Crona M, Furrer E, Torrents E, Edgell DR 等 5 人

核糖核苷酸还原酶(RNR)负责合成 DNA 复制与修复所需的脱氧核糖核苷酸,其活性受核苷酸对调节位点差异亲和性的复杂变构调控。作者开发了一种稳健且灵敏的方法,通过 30.5 Å 连接臂将生物素化 RNR 偶联到表面等离子共振(SPR)链霉亲和素生物传感器芯片上。对三种 RNR 的系统研究表明,效应核苷酸可增强全酶亚基间相互作用,而底...