Intracellular Ionic Strength Sensing Using NanoLuc.
细胞内离子强度通过调节蛋白质活性、聚集、相分离和细胞体积等过程，影响细胞存活与增殖，并可因离子通道活性或微环境渗透压改变而变化，因此需要实时监测工具。本文开发了一种基于 NanoLuc 荧光素酶的生物发光细胞内离子强度传感策略。重组纯化蛋白实验表明，NanoLuc 生物发光在宽范围缓冲液离子强度条件下具有离子强度依赖性；高离子强度下...
DNAzyme-based biosensor for Cu(2+) ion by combining hybridization chain reaction with fluorescence resonance energy transfer technique.
本文报道了一种基于 Cu2+ 依赖型 DNAzyme 的新型信号放大策略，用于检测 Cu2+ 离子。该方法将杂交链反应（HCR）与荧光共振能量转移（FRET）技术相结合。在 Cu2+ 存在下，固定在磁珠上的 Cu2+ 依赖型 DNAzyme 的底物链被特异性切割并释放。释放的链作为起始链，触发分别标记羧基荧光素（FAM）供体和四甲基...
Optimization of ERK activity biosensors for both ratiometric and lifetime FRET measurements.
在生物传感器中，遗传编码的荧光共振能量转移（FRET）生物传感器被广泛用于在活细胞或组织中定位并测量酶活性。激酶活性尤其重要，因为其时空调控对理解细胞命运决定至关重要；ERK 是信号转导通路中的关键节点，可引导细胞进入不同生理过程。为在体内分析激酶并检测其活性的细微变化，需要更好的工具。本文报道了对先前 ERK 活性报告分子 EKA...
Long wavelength fluorescence ratiometric zinc biosensor.
本文报道一种基于蛋白的发射比率荧光生物传感器，用于检测溶液中游离锌离子，灵敏度达皮摩尔水平。该传感器以去锌碳酸酐酶II为识别单元，Alexa Fluor 594共价标记于His36Cys位点作为荧光供体；当Zn2+结合去锌酶后，促进Chesapeake Blue磺酰胺进入活性中心并作为FRET受体。590 nm激发下，供体617 n...