Real-time bio-layer interferometry ubiquitination assays as alternatives to western blotting.

Analytical biochemistry 2023 De Silva ARI, Shrestha S, Page RC

泛素化是维持正常细胞功能的关键通路，其异常可导致细胞功能障碍并引发多种疾病。筛选和开发靶向泛素化级联的小分子抑制剂需要快速、稳健的检测方法。目前检测泛素化的常用技术包括荧光、分光光度、化学发光、核磁共振和放射性示踪，其中 Western blot 最常用，但耗时长且难以用于精细时间过程研究。本文提出利用生物层干涉仪（BLI）实时、快...

其他 生物层干涉仪泛素化E3泛素连接酶CHIP

The PINK1 kinase-driven ubiquitin ligase Parkin promotes mitochondrial protein import through the presequence pathway in living cells.

Scientific reports 2019 Jacoupy M, Hamon-Keromen E, Ordureau A, Erpapazoglou Z 等 15 人

线粒体中超过一千种蛋白大多由核基因编码，需从胞质导入。由于缺乏在活细胞中评估该过程的工具，胞质事件如何调控线粒体蛋白导入仍不清楚。作者构建了一种可诱导、基于生物发光定量读出的分子生物传感器，用于监测主要的前序列介导线粒体蛋白导入通路。该探针由可切除的线粒体靶向信号、RGFP、RLuc及条件性不稳定域组成，只有在线粒体基质中切除靶向信...

其他 生物传感器线粒体蛋白导入PINK1/Parkin生物发光