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Split T7 RNA polymerase biosensors to study multiprotein interaction dynamics.

Methods in enzymology 2020 Dewey JA, Dickinson BC

蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs)参与几乎所有细胞过程,并在信号通路中选择性调控中尤为关键。因此,在活细胞中测量竞争性PPI网络对于理解细胞调控和开发靶向PPI失调疾病的疗法具有重要意义。多种蛋白片段互补(PFC)报告工具可判断两个蛋白是否在细胞内相互作用,但通常难以同时区分多个相互作用,主要受限于正交组分不足或输出信号光谱重叠。进...

Enabling systematic interrogation of protein-protein interactions in live cells with a versatile ultra-high-throughput biosensor platform.

Journal of molecular cell biology 2016 Mo XL, Luo Y, Ivanov AA, Su R 等 9 人

大型基因组学研究产生了大量数据,但如何快速解析复杂的蛋白-蛋白相互作用(PPIs)以支持功能研究和治疗干预仍是挑战。现有PPI检测技术虽多,但能在哺乳动物活细胞环境中同时具备高灵敏度与稳健性的单一PPI生物传感器平台仍缺乏。本文开发并整合了一种基于NanoLuc荧光素酶的高灵敏生物发光共振能量转移技术,称为BRETn,用于活细胞中超...