细胞内过氧化氢（H2O2）水平受严格调控，并可被多种刺激物调节。多种纳米酶具有过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）等氧化还原酶样活性，部分还具有多酶样特性，但其在细胞内的具体作用难以预测和检测。本研究在白血病细胞系 THP-1 的胞质和线粒体中表达 HyPer7 探针，构建实时、动态、高灵敏的活细胞生...
三维培养模型，尤其是多球体模型，在癌症药物发现及干细胞与癌症干细胞（CSC）研究中日益重要，但适用于单细胞和单球体分析的检测方法仍有限。本研究建立了整合 CSC 活细胞生物传感器与三维表面整合球体分析（3D-SiSP）方法的胆管癌三维多球体模型，利用高内容共聚焦成像量化球体面积，支持高通量与低通量分析。作者展示了三项关键应用：首先，...
传统缺氧诱导因子（HIF）激活通常通过缺氧反应元件（HRE）基因报告实验监测下游转录活性。本文开发一种直接感知 HIF 激活的新方法，通过监测 HIFα/HIFβ 亚基异源二聚化来检测功能性 HIF 转录因子形成。作者设计两种活细胞生物传感器检测体系，利用分裂纳米荧光素酶（split-nanoluciferase）功能互补技术，测量...
蛋白质-蛋白质相互作用（PPIs）参与几乎所有细胞过程，并在信号通路中选择性调控中尤为关键。因此，在活细胞中测量竞争性PPI网络对于理解细胞调控和开发靶向PPI失调疾病的疗法具有重要意义。多种蛋白片段互补（PFC）报告工具可判断两个蛋白是否在细胞内相互作用，但通常难以同时区分多个相互作用，主要受限于正交组分不足或输出信号光谱重叠。进...
本研究报道了一种用于总体评估不同基底粘附质量的活细胞生物传感器。该传感器基于稳定表达融合荧光标记蛋白 mCherry-vinculin 和 GFP-tensin 的 NIH/3T3 成纤维细胞系，利用两种荧光蛋白在细胞黏附结构中的不同定位，作为可定量标记，不仅用于评估局灶黏附，也用于评估纤维状黏附。研究采用细胞铺展面积、细胞极化指数...
大型基因组学研究产生了大量数据，但如何快速解析复杂的蛋白-蛋白相互作用（PPIs）以支持功能研究和治疗干预仍是挑战。现有PPI检测技术虽多，但能在哺乳动物活细胞环境中同时具备高灵敏度与稳健性的单一PPI生物传感器平台仍缺乏。本文开发并整合了一种基于NanoLuc荧光素酶的高灵敏生物发光共振能量转移技术，称为BRETn，用于活细胞中超...
微尺度打印和图案化活细胞在组织工程、细胞信号检测和细胞基生物传感器制造中具有多种应用。本研究改造分子打印仪 Bioforce Nano eNabler，使其能够以微米级“羽毛笔”方式在基于透明质酸/明胶的三维水凝胶中打印哺乳动物细胞。具体采用光引发巯基-烯点击化学，将巯基化透明质酸和巯基化明胶的巯基与四臂聚乙二醇-降冰片烯分子的烯烃...
本研究利用双色肌浆/内质网钙泵（SERCA）生物传感器和新型高通量荧光寿命读板仪（FLT-PR），建立了一种用于筛选扰动 SERCA 结构的小分子的高精度活细胞检测体系。该体系将红色荧光蛋白（RFP）融合于 SERCA N 端，将绿色荧光蛋白（GFP）融合于 N 域内部环，并在可单层或悬浮生长的 HEK 细胞系中稳定表达。通过 FL...
本研究开发了一种基于表面等离子共振（SPR）的无标记活细胞生物传感器，用于G蛋白偶联受体（GPCR）配体结合功能检测，并通过细胞内信号增强提高灵敏度。以β2-肾上腺素受体为模型，将其异源表达于人胚胎肾细胞（HEK-293）质膜上，利用SPR实时监测受体与配体结合引发的细胞膜附近折射率变化。结果表明，表达β2-肾上腺素受体的细胞对异丙...
背景：工程纳米材料（ENMs）不断涌现，纳米毒理学与环境健康安全亟需在材料广泛使用前评估其毒性。传统细胞检测以离散时间点和有机染料为主，易受ENMs干扰，需要无标记、连续、快速且具有生物学意义的检测系统。我们开发了一种活细胞石英晶体微天平生物传感器（QCMB），利用贴附于石英晶体上的巨噬细胞，通过晶体振荡频率变化（Δf）连续监测细胞...