ACS synthetic biology
2021
Flachbart LK, Gertzen CGW, Gohlke H, Marienhagen J
蛋白或微生物菌株设计的高通量表征耗时费力,限制了高性能生物催化剂的开发。转录生物传感器可将难以观察的生产表型转化为可检测信号,从而在短时间内快速表征数千个变体;但许多目标分子缺乏决定传感器特异性的特异性转录调控因子。本文提出一种结合半理性过渡配体策略与流式细胞分选(FACS)的方法,用于快速工程化生物传感器特异性。该两步策略首先将生...
Bioprocess and biosystems engineering
2021
大肠杆菌中 L-色氨酸(L-Trp)生产长期依赖随机诱变与筛选,但所得菌株遗传背景不清。本研究将细胞内 L-Trp 生物传感器与流式细胞分选(FACS)结合,在大肠杆菌中筛选获得 L-Trp 高产株 TPD5,并系统阐明其过量生产的遗传基础。全基因组测序鉴定出多个突变,其中影响最显著的正向突变包括 TnaA 缺失、AroG S211...
Microbial cell factories
2021
Liu ZX, Huang SL, Hou J, Guo XP 等 6 人
高价值多糖通常由野生型或代谢工程微生物宿主通过发酵生产。这些宿主作为细胞工厂,将单糖或淀粉等碳水化合物转化为具有生物活性的多糖。因此,开发有效的体内高通量方法筛选能够高水平合成目标多糖的细胞具有重要意义。单色或双色荧光标记、荧光猝灭以及生物传感器等策略可用于细胞库分选,适用于工业工程菌株驯化和工程细胞中多糖合成代谢通路的优化。同时,...
International journal of molecular sciences
2021
甲醇脱氢酶(Mdh)是利用甲烷和甲醇作为碳源与能源的关键酶,在甲基营养和合成甲基营养中具有重要作用。NAD 依赖型 Mdh 因单亚基、可在有氧和厌氧条件下产生 NADH 而成为合成甲基营养工程的重要候选,但其催化活性低、对甲醇亲和力不足限制了应用。本研究采用基于转录因子的生物传感器,对来自 Lysinibacillus xylani...