BMC research notes
2025
Tomari R, Yamaguchi S, Soma N, Kikawada T 等 5 人
海藻糖是蚜虫血淋巴中的主要糖类，但由于蚜虫体型小，单虫水平准确定量在技术上具有挑战性。本研究利用基于绿色荧光蛋白（GFP）的荧光生物传感器 Tre-C04，在单只蚜虫水平定量血淋巴海藻糖，并以高效液相色谱（HPLC）作为基准，考察物种及翅型差异。HPLC 测定池样豌豆蚜成虫血淋巴海藻糖为 218.9±34.4 mM，而 Tre-C0...
Nature communications
2016
Nadler DC, Morgan SA, Flamholz A, Kortright KE 等 5 人
单荧光蛋白生物传感器（SFPBs）可在活细胞内以单细胞时空分辨率定量代谢物，但将绿色荧光蛋白（GFP）理性插入配体结合域并形成有效变构耦合仍是构建瓶颈。本文提出一种无偏高通量方法——基于 DNA 测序的域插入分析（DIP-seq），通过转座子介导的随机域插入快速构建大量潜在 SFPB 文库，并结合流式细胞分选（FACS）与下一代测序...
Bioscience, biotechnology, and biochemistry
2016
Kikuta S, Hou BH, Sato R, Frommer WB 等 5 人
海藻糖是哺乳动物细胞中的应激保护剂和自噬诱导剂，但其胞内有效浓度处于微摩尔至毫摩尔范围，传统 HPLC 等碳水化合物检测方法最低可测浓度不低于 1 mM，且细胞提取过程可能造成降解，难以实现微尺度、非破坏性定量。本文报道一种基于 Förster 共振能量转移（FRET）的遗传编码海藻糖监测技术。作者将 CFP 与 mVenus 分别...